Anti-OTUB1 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q96FW1

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von OTUB1

• OTUB1 ist eine deubiquitinierende Enzym, die spezifisch 'Lys-48'-verknüpfte Polyubiquitinketten hydrolysiert und eine entscheidende Rolle im Proteinumsatz und -abbau spielt (PubMed:12401499, 12704427, 14661020). Zugehörige Referenzen: PMID:12401499 PMID:12704427 PMID:14661020
• Das Gen codiert durch alternatives Spleißen zwei Isoformen: Isoform 1 (ubiquitinär) destabilisiert RNF128, um T-Zell-Anergie zu verhindern, während Isoform 2 (lymphoid-spezifisch) RNF128 stabilisiert und die Anergie fördert (PubMed:14661020). Zugehörige Referenzen: PMID:14661020
• Neben seiner katalytischen Aktivität wirkt OTUB1 nicht-katalytisch bei der DNA-Schadensreparatur, indem es freies Ubiquitin bindet und UBE2N/UBC13 hemmt, wodurch die RNF168-vermittelte 'Lys-63'-verknüpfte Histon-Ubiquitinierung begrenzt wird (PubMed:20725033, 22325355). Zugehörige Referenzen: PMID:20725033 PMID:22325355
• OTUB1 deubiquitiniert den Östrogenrezeptor alpha (ESR1) und kann NEDD8-Konjugate entfernen, allerdings mit geringerer Effizienz als bei 'Lys-48'-verknüpftem Ubiquitin (PubMed:19383985, 18954305, 23827681). Zugehörige Referenzen: PMID:19383985 PMID:18954305 PMID:23827681
• Die Phosphorylierung an Tyr-26 reguliert die mTORC1-Aktivität durch Vermittlung der nicht-katalytischen Deubiquitinierung von RPTOR, während die aminoabhängige Deubiquitinierung von DEPTOR mTORC1 und mTORC2 hemmen kann (PubMed:29382726, 35927303). Zugehörige Referenzen: PMID:29382726 PMID:35927303
• Die subzelluläre Lokalisation ist überwiegend zytoplasmatisch.
• Isoform 1 wird ubiquär exprimiert, während Isoform 2 auf lymphoide Gewebe (Mandeln, Lymphknoten, Milz) und periphere mononukleäre Blutzellen beschränkt ist.
• OTUB1 gehört zur OTU-Domänen-Familie der Thiolproteasen und wird als Hydrolase klassifiziert; es ist an Immunprozessen, der DNA-Reparatur und Ubiquitin-Konjugationswegen beteiligt.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen deckt die N-terminale Region (AS 1‑220) des humanen OTUB1 ab, die die OTU-Domäne umfasst; die beobachtete Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte deutet auf eine Konservierung dieser Region hin.
• Für den Western Blot erwarten Sie eine Bande nahe 31 kDa; verwenden Sie geeignete Positivkontrollen (z. B. HeLa- oder Jurkat-Lysate) und erwägen Sie einen siRNA-Knockdown zur Bestätigung der Spezifität.
• Führen Sie bei Immunfluoreszenz/ICC eine Standard-Fixierung und Permeabilisierung durch; erwarten Sie ein zytoplasmatisches Färbemuster.
• Für ELISA-Anwendungen optimieren Sie die Beschichtungs-Antigenkonzentration und Antikörperverdünnungen; eine Paarung mit einem Detektionsantikörper kann die Entwicklung von Sandwich-Assays unterstützen.
• Obwohl gezeigt wurde, dass der Antikörper mit Proben von Mensch, Maus und Ratte reagiert, überprüfen Sie immer die Leistung in Ihrem spezifischen experimentellen System.

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