Anti-OTUB1 polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q96FW1

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: OTUB1-Funktion und Lokalisierung

• OTUB1 ist eine Ubiquitin-Thioesterase, die spezifisch 'Lys-48'-verknüpfte Polyubiquitinketten von Proteinen spaltet, mit deutlich geringerer Aktivität gegenüber NEDD8; sie spaltet kein Di-Ubiquitin (PubMed:12401499, 12704427, 14661020, 18954305, 23827681). Verwandte Referenzen: PMID:12401499 PMID:12704427 PMID:14661020 PMID:18954305 PMID:23827681
• Es reguliert die T-Zell-Anergie durch Interaktion mit RNF128/GRAIL: Isoform 1 destabilisiert RNF128, um Anergie zu verhindern, während Isoform 2 RNF128 stabilisiert und Anergie fördert (PubMed:14661020). Verwandte Referenzen: PMID:14661020
• OTUB1 spielt eine nicht-katalytische Rolle bei der DNA-Reparatur, indem es die E3-Ligase RNF168 durch Bindung an UBE2N/UBC13 hemmt und so die Ausbreitung von 'Lys-63'-verknüpften Histon-Ubiquitinierungsmarkierungen an Schadensstellen begrenzt; diese Hemmung wird allosterisch durch freies Ubiquitin reguliert (PubMed:20725033, 22325355). Verwandte Referenzen: PMID:20725033 PMID:22325355
• Es reguliert die mTORC1- und mTORC2-Komplexe über nicht-katalytische Deubiquitinierung von RPTOR (wenn an Tyr-26 phosphoryliert) und DEPTOR (PubMed:29382726, 35927303). Verwandte Referenzen: PMID:29382726 PMID:35927303
• Deubiquitiniert den Östrogenrezeptor alpha (ESR1) (PubMed:19383985). Verwandte Referenzen: PMID:19383985
• Subzelluläre Lokalisation: hauptsächlich zytoplasmatisch.
• Isoform 1 wird ubiquitär exprimiert, während Isoform 2 auf lymphatische Gewebe (Mandeln, Lymphknoten, Milz, periphere mononukleäre Blutzellen) beschränkt ist.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung (z.B. Tyr-26) und Acetylierung, und das Protein ist an Prozessen wie DNA-Schadensantwort, adaptiver Immunität und Thiolprotease-Aktivität beteiligt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 50–150 von humanem OTUB1, einer Region, die in beiden Isoformen vorhanden ist; berücksichtigen Sie dies bei der Interpretation von Ergebnissen in lymphatischen vs. nicht-lymphatischen Proben.
• Für Western Blot (WB) ist ein Band bei etwa 31 kDa zu erwarten. Optimieren Sie die Blockierung und Antikörperverdünnung für Ihren spezifischen Probentyp.
• Für ELISA können sowohl direkte als auch Capture-Formate geeignet sein; validieren Sie die Beschichtungs- und Detektionsbedingungen mit gereinigtem Protein oder Lysaten.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus-OTUB1 und kann daher in Mausmodellen verwendet werden, überprüfen Sie jedoch die Spezifität in Ihrem experimentellen System.
• Berücksichtigen Sie den funktionellen Kontext: OTUB1 ist an Deubiquitinierung, DNA-Reparatur und mTOR-Signalgebung beteiligt, daher können geeignete Kontrollen (z.B. Ubiquitinierungsstatus, DNA-Schadensinduktion) erforderlich sein.

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