Anti-OTOF polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q9HC10

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Otoferlin-Funktion und -Lokalisierung

• Otoferlin (Fer-1-ähnliches Protein 2) ist ein Multi-Isoform-Protein; Isoform 1 und 3 werden im adulten Gehirn exprimiert, während Isoform 2 in Fötus und adultem Gehirn, Herz, Plazenta, Skelettmuskel und Niere vorkommt.
• Fungiert als zentraler Kalziumsensor an Bandensynapsen cochleärer innerer Haarzellen (IHCs), löst synaptische Vesikelexozytose und Neurotransmitterfreisetzung aus, indem es in kalziumabhängiger Weise mit präsynaptischen SNARE-Proteinen interagiert.
• Ebenso essentiell für synaptische Exozytose in unreifen äußeren Haarzellen (OHCs) und könnte eine Rolle im Endosomen-Recycling spielen.
• Gehört zur Ferlin-Familie von Proteinen, charakterisiert durch multiple C2-Domänen, die kalziumabhängige Membraninteraktionen vermitteln.
• Subzellulär lokalisiert in zytoplasmatischen Vesikeln, synaptischen Vesikelmembranen, basolateraler Zellmembran, endoplasmatischem Retikulum, Golgi-Apparat, präsynaptischer Zellmembran, Zellmembran und trans-Golgi-Netzwerk.
• Enthält Transmembranregionen und einen Signalanker, der es an Membranen synaptischer Vesikel und der präsynaptischen Plasmamembran verankert.
• Assoziiert mit genetischer Taubheit: Mutationen verursachen autosomal-rezessiven nicht-syndromalen Hörverlust (DFNB9) und auditorische Neuropathie-Spektrum-Störung.
• Posttranslationale Modifikationen und strukturelle Merkmale umfassen Metallbindung, Coiled-Coil-Regionen und multiple C2-Domänen für Kalziumbindung, entscheidend für die synaptische Funktion.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für WB: Aufgrund der großen Proteingröße (~227 kDa) SDS-PAGE-Gele mit niedrigem Prozentsatz und verlängerte Transferzeiten verwenden; in geeigneten humanen Gewebelysaten (z.B. Gehirn, Cochlea-Gewebe) verifizieren.
• Für ELISA: Die Immunogenregion (N-terminal 1-300) kann zum Einfangen oder Nachweisen von Otoferlin verwendet werden; für Sandwich-ELISA die Kombination mit einem anderen Antikörper, der ein anderes Epitop erkennt, in Betracht ziehen.
• Antikörperspezifität im relevanten Proben-System validieren, da die Otoferlin-Expression gewebespezifisch ist und Isoformen variieren; humane Gehirnlysate oder transfizierte Zelllinien sind geeignete positive Kontrollen.
• Da Otoferlin ein synaptisches Vesikelprotein ist, kann subzelluläre Fraktionierung das Signal in Membranfraktionen anreichern.

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