Anti-Osteopontin monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P10451

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Osteopontin

• Osteopontin (OPN), kodiert durch das SPP1-Gen (auch bekannt als BNSP, Bone Sialoprotein 1, ETA-1), ist ein sekretiertes Glykoprotein, das zur SIBLING-Proteinfamilie gehört.
• Es fungiert als wichtiges nicht-kollagenes Knochenmatrixprotein, bindet fest an Hydroxylapatit und spielt eine wesentliche Rolle bei der Biomineralisation und der Zell-Matrix-Adhäsion.
• Wirkt als Zytokin, das die Produktion von Interferon-gamma und Interleukin-12 verstärkt und gleichzeitig Interleukin-10 reduziert, wodurch die Typ-I-Immunität gefördert wird.
• OPN wird primär sekretiert und findet sich in verschiedenen Körperflüssigkeiten und Geweben, einschließlich Knochen, Plasma, Liquor und Urin.
• Auf Proteinebene im Liquor und Urin nachgewiesen und in Knochen stark exprimiert. Zugehörige Referenzen: PMID:25326458 PMID:36213313 PMID:37453717
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Phosphorylierung und die Anlagerung von Sialinsäure, was zu seiner funktionellen Vielfalt beiträgt.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen mit unterschiedlichen funktionellen Eigenschaften.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem synthetischen Peptid innerhalb der Aminosäuren 200-300 des humanen Osteopontins (P10451) und zielt auf die C-terminale Region ab. Beim Western Blot ist eine Bande bei etwa 35 kDa zu erwarten; erwägen Sie die Optimierung der Probenvorbereitung für sekretierte Proteine, z. B. durch die Verwendung von serumfreiem konditioniertem Medium oder konzentrierten biologischen Flüssigkeiten.
• Für ELISA-Anwendungen kombinieren Sie diesen Detektionsantikörper mit einem geeigneten Fängerantikörper, der für humanes Osteopontin validiert ist; titrieren Sie beide Antikörper, um die optimalen Konzentrationen für Ihr spezifisches Assay-Format zu bestimmen.
• Obwohl in humanen Proben validiert, wurde keine Kreuzreaktivität mit anderen Spezies berichtet; bei einer Ausweitung auf andere Spezies wird ein Sequenzabgleich empfohlen und eine experimentelle Validierung sollte durchgeführt werden.
• Verwenden Sie geeignete Positiv- und Negativkontrollen, wie z. B. rekombinantes humanes Osteopontin-Protein und Knockout-Zelllysate, um die Spezifität in Ihrem System zu bestätigen.

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