Kaninchen-polyklonaler Antikörper gegen Anti-Orexin B/Hypocretin-2 für WB, ELISA – O43612

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Orexin B/Hypocretin-2

• Der Vorläufer des Hypocretin-Neuropeptids (Prepro-Orexin) wird in zwei reife Neuropeptide verarbeitet: Orexin-A (Hypocretin-1) und Orexin-B (Hypocretin-2), die Sequenzhomologien aufweisen, jedoch unterschiedliche Rezeptorbindungsprofile besitzen.
• Orexin-B/Hypocretin-2 bindet spezifisch an den Orexin-Rezeptor HCRTR2/OX2R und spielt eine wichtige Rolle bei der zentralen Regulation von Fressverhalten, Energiehomöostase und Schlaf-Wach-Zyklen.
• Orexinerge Neuronen sind hauptsächlich im lateralen Hypothalamus lokalisiert; auf subzellulärer Ebene ist der Vorläufer im rauen endoplasmatischen Retikulum, in zytoplasmatischen Vesikeln und an Synapsen lokalisiert.
• Orexin-B/Hypocretin-2 ist an der Modulation der Sekretion des luteinisierenden Hormons der Hypophyse in Abhängigkeit von Ovarialsteroiden beteiligt, was auf eine Rolle bei der neuroendokrinen Reproduktionsfunktion hindeutet.
• Der Vorläufer enthält ein Signalpeptid, wird an Paaren basischer Aminosäurereste gespalten und weist posttranslationale Modifikationen einschließlich Amidierung und Bildung von Pyrrolidoncarbonsäure auf, die für die Bioaktivität entscheidend sind.
• Eine starke Expression wird im Nucleus subthalamicus nachgewiesen, während in anderen Hirnregionen und peripheren Geweben keine nachweisbare Expression festgestellt wird (der Hypothalamus wurde nicht getestet).

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus der N-terminalen Region (AS 1–100) des humanen Orexin B/Hypocretin-2. Der Antikörper kann je nach Probenvorbereitung und Prozessierung sowohl den Vorläufer als auch das reife Peptid erkennen.
• Für den Western Blot (WB) sollte das vorhergesagte Molekulargewicht des Vorläufers von etwa 13 kDa sowie das kleinere reife Orexin-B-Peptid berücksichtigt werden; die Detektion sollte mithilfe geeigneter Positivkontrollen wie Lysaten von Gehirngewebe oder rekombinantem Protein validiert werden.
• Beim ELISA sollten eine direkte Beschichtung mit dem Peptid oder Sandwich-Formate geprüft werden; aufgrund der Sequenzähnlichkeit innerhalb der Immunogenregion sollte eine mögliche Kreuzreaktivität mit Orexin-A bewertet werden.
• Geeignete Positiv- und Negativkontrollen einbeziehen und die Verdünnungsfaktoren für jede Anwendung empirisch optimieren.

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