Anti-OGT monoklonaler Antikörper für WB, ELISA, ChIP - O15294

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: OGT-Funktion und Lokalisierung

• OGT (UDP-N-Acetylglucosamin--Peptid N-Acetylglucosaminyltransferase 110 kDa Untereinheit) ist die katalytische Untereinheit des O-GlcNAc-Transferase-Komplexes, verantwortlich für das Anhängen eines einzelnen N-Acetylglucosamins (O-GlcNAc) an Serin/Threonin-Reste von nukleären und zytoplasmatischen Proteinen (PubMed:12150998, PubMed:15361863, PubMed:19451179). Verwandte Referenzen: PMID:12150998, PMID:15361863, PMID:19451179
• Es glykosyliert eine Vielzahl von Substraten, einschließlich Histon H2B, AKT1, AMPK, EZH2, MAPT/TAU und vielen anderen, wodurch Schlüsselprozesse wie Transkription, Insulin-Signalweg, Autophagie und zirkadiane Rhythmen reguliert werden (PubMed:19451179, PubMed:20200153, PubMed:21285374). Verwandte Referenzen: PMID:19451179, PMID:20200153, PMID:21285374
• OGT existiert in mehreren Isoformen, einschließlich einer mitochondrialen Isoform (mOGT), die zytotoxisch ist und Apoptose fördert, insbesondere in Insulinomzellen. Es hat auch eine spezialisierte N-Acetylglucosaminyltransferase-Aktivität mit unterschiedlicher Substratpräferenz (PubMed:31527085). Verwandte Referenzen: PMID:31527085
• Das Enzym lokalisiert im Zellkern, Zytoplasma, Mitochondrien und der Zellmembran, was seine vielfältigen funktionellen Rollen widerspiegelt.
• Posttranslationale Modifikationen von OGT umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, und es ist an Ubiquitin-Konjugationswegen beteiligt. Schlüsselwörter heben auch seine Beteiligung an Apoptose, biologischen Rhythmen, Chromatinregulation und Wirt-Virus-Interaktionen hervor.
• OGT ist hoch exprimiert in der Bauchspeicheldrüse, mit moderaten Mengen in Skelettmuskel, Herz, Gehirn und Plazenta, und Spurenmengen in Lunge und Leber, was seiner Rolle im Insulin-Signalweg und der Glukosehomöostase entspricht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen-Peptid entspricht den Resten 947–1046 von humanem OGT, einer Region, die im nativen Protein wahrscheinlich exponiert ist; erwägen Sie die Verwendung dieses Antikörpers für denaturierenden Western Blot, wo das Epitop zugänglich ist.
• Für ChIP-Assays validieren Sie die Vernetzungsbedingungen und die Antikörperspezifität mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen, angesichts der Chromatin-Assoziation von OGT.
• Im Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~117 kDa; jedoch können multiple Isoformen und umfangreiche posttranslationale Modifikationen zu zusätzlichen Banden oder Verschiebungen führen; verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker.
• Bei der Arbeit mit Nagetierproben bestätigen Sie die Reaktivität in Maus- oder Rattengeweben, da der Antikörper Kreuzreaktivität zeigt; eine Optimierung der Verdünnung und Blockierbedingungen wird empfohlen.

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