Anti-NUP98-polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P52948

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von NUP98

• NUP98, auch bekannt als ADIR2, NUP96, NUP196 oder Nup98-96, ist Bestandteil des Kernporenkomplexes (NPC) und wird als Vorläuferprotein gebildet, das einer autokatalytischen Spaltung unterliegt und NUP98 sowie NUP96 erzeugt, die beide für die Funktion des NPC wesentlich sind.
• Es spielt eine entscheidende Rolle bei der Montage und Aufrechterhaltung des NPC. Sowohl NUP98 als auch NUP96 werden für den bidirektionalen nukleozytoplasmatischen Transport benötigt. Zugehörige Referenzen: PMID:33097660
• In Zusammenarbeit mit DHX9 ist NUP98 an der Transkriptionsregulation und dem alternativen Spleißen bestimmter Gene beteiligt und wirkt an der Lokalisierung von DHX9 in diskreten intranukleären Foci mit, die als GLFG-Körper bezeichnet werden. Zugehörige Referenzen: PMID:28221134
• Das Protein lokalisiert sich an der Kernmembran und befindet sich überwiegend am Kernporenkomplex, ist jedoch zusätzlich im Nukleoplasma vorhanden.
• Zu den wichtigen posttranslationalen Modifikationen gehören Acetylierung, Phosphorylierung, Isopeptidbindung und Ubiquitin-ähnliche Konjugation, die seine Funktion und Wechselwirkungen regulieren können.
• NUP98 interagiert mit dem HIV-1-Kapsidprotein P24 und dem Nukleokapsidprotein P7 und könnte dadurch die virale Integration in den Wirtszellkern erleichtern. Bei bestimmten Kapsidmutationen wurde eine verringerte Bindungsaffinität beobachtet. Zugehörige Referenzen: PMID:23523133
• Das Protein weist FG/GLFG-Wiederholungsdomänen auf, die als Andockstellen für Transportrezeptoren dienen und den selektiven Durchtritt von Makromolekülen durch den NPC ermöglichen.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht einer Region innerhalb des NUP98-Anteils (AS 621-920) des vollständigen NUP98-Vorläufers. Dies deutet darauf hin, dass der Antikörper hauptsächlich die gespaltene NUP98-Form erkennt, möglicherweise jedoch aufgrund der Sequenzüberlappung auch den Vorläufer bindet.
• Beim Western Blot kann abhängig von der Probenvorbereitung und den Elektrophoresebedingungen eine Bande bei etwa 98 kDa (gespaltenes NUP98) oder 198 kDa (Vorläufer) beobachtet werden. Zur Validierung sollten Kernextrakte aus humanen oder murinen Zellen verwendet werden.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC ist eine punktförmige Färbung am Kernrand zu erwarten, die für Kernporenkomplexe charakteristisch ist. Für den Zugang des Antikörpers ist eine Permeabilisierung erforderlich.
• ELISA-Anwendungen können zur Quantifizierung der NUP98-Spiegel in Zelllysaten oder gereinigten Fraktionen eingesetzt werden. Die Beschichtungs- und Nachweisbedingungen sollten empirisch optimiert werden.

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