Anti-NUMA1 Kaninchen-polyklonale Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14980

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von NUMA1

• Das Nukleare Mitoseapparat-Protein 1 (NUMA1), auch bekannt als NuMA, NMP-22 oder SP-H-Antigen, ist ein großes 238 kDa schweres Coiled-Coil-Protein, das vom NUMA1-Gen kodiert wird. Es ist ein Hauptbestandteil der Kernmatrix.
• NUMA1 spielt eine entscheidende Rolle bei der Bildung und Erhaltung der Spindelpole während der Mitose, indem es die Minus-Enden von Mikrotubuli verankert und so eine korrekte Chromosomenausrichtung und -segregation gewährleistet.
  Verwandte Referenzen: PMID:11956313 PMID:12445386
• Es wirkt an der Orientierung und Verlängerung der mitotischen Spindel über Dynein-Dynactin-abhängige Mechanismen mit und interagiert mit kortikalen Komplexen, die GPSM2 und Gα-Proteine enthalten, sowie mit Phosphoinositiden wie PI(4,5)P2.
  Verwandte Referenzen: PMID:22327364 PMID:23027904 PMID:23921553 PMID:24371089 PMID:24996901 PMID:23870127 PMID:24109598
• NUMA1 wird ebenfalls für die Assemblierung mitotischer Mikrotubuli-Aster und die Bildung anastraler Spindeln benötigt und reguliert die Lokalisierung von TNKS an den Spindelpolen positiv.
  Verwandte Referenzen: PMID:11163243 PMID:11229403 PMID:12445386 PMID:25657325 PMID:16076287
• Jenseits der Mitose ist NUMA1 ein sehr reichlich vorhandenes Kernmatrixprotein, das den Großteil des Kernvolumens einnimmt, was auf eine strukturelle Rolle hindeutet. Es ist unverzichtbar für die epidermale Differenzierung und die Morphogenese von Haarfollikeln.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst den Zellkern, Nukleoplasma, Kernmatrix, Spindelpole, Zentrosomen, Zellkortex und seitliche Zellmembran – dies spiegelt seine dynamischen Rollen sowohl in der Interphase als auch in der Mitose wider.
• Posttranslationelle Modifikationen umfassen Acetylierung, ADP-Ribosylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, wie in UniProt annotiert (Isopeptidbindung, Ubl-Konjugation, Glykoprotein, Lipoprotein), die seine Funktionen regulieren können.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Aufgrund des hohen Molekulargewichts von NUMA1 (ca. 238 kDa) sollte beim Western Blotting ein Polyacrylamidgel mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6–8%) und eine verlängerte Transferzeit verwendet werden, um einen effizienten Transfer zu gewährleisten.
• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 1–309) des humanen NUMA1; überprüfen Sie, dass diese Region in Ihren Proben nicht durch posttranslationelle Modifikationen oder Bindungspartner blockiert ist.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) zeigt NUMA1 eine nukleäre Lokalisation in Interphasezellen und eine Spindelpol-Lokalisation in mitotischen Zellen; optimieren Sie Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen, um die Antigenität zu erhalten.
• Bei der Immunhistochemie (IHC) kann bei formalinfixierten, paraffineingebetteten Geweben eine Antigen-Retrieval-Methode erforderlich sein; validieren Sie die Färbemuster anhand bekannter subzellulärer Lokalisationen.
• Als polyklonaler Antikörper kann es zu Chargenvariationen kommen; führen Sie in jedem Experiment geeignete Positiv- und Negativkontrollen durch.

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