Anti-NUDT5 monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q9UKK9

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NUDT5-Funktion und -Lokalisierung

• NUDT5 ist ein Enzym mit Doppelfunktion: In Abwesenheit von Diphosphat wirkt es als ADP-Zucker-Pyrophosphatase und hydrolysiert verschiedene modifizierte Nukleosiddiphosphate; in Gegenwart von Diphosphat katalysiert es die ATP-Synthese. Verwandte Referenzen: PMID:27257257
• Als ADP-Zucker-Pyrophosphatase hydrolysiert NUDT5 Substrate wie ADP-Ribose, ADP-Mannose, ADP-Glucose, 8-Oxo-GDP und 8-Oxo-dGDP mit ähnlicher Effizienz. Verwandte Referenzen: PMID:10567213, PMID:10722730, PMID:17052728
• Im Zellkern vermittelt NUDT5 die ATP-Synthese durch Umwandlung von ADP-Ribose in ATP und Ribose-5-phosphat, eine Reaktion, die von seiner Dephosphorylierung an Thr-45 abhängt. Verwandte Referenzen: PMID:27257257
• Die nukleäre ATP-Generierung durch NUDT5 ist entscheidend für energieverbrauchende Chromatin-Remodelling-Ereignisse. Verwandte Referenzen: PMID:27257257
• NUDT5 zeigt in vitro Decapping-Aktivität an UDP-GlcNAc-gecappter RNA und spaltet die Pyrophosphatbrücke der Zucker-Kappe. Verwandte Referenzen: PMID:38716860
• NUDT5 bindet U8-snoRNA, decappt sie aber nicht, was auf eine Rolle im RNA-Metabolismus jenseits seiner enzymatischen Aktivitäten hindeutet.
• Das Protein ist im Zellkern lokalisiert und weit verbreitet exprimiert, mit den höchsten Konzentrationen in der Leber.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da das Immunogen der N-terminalen Region (aa 1–100) entspricht, wird erwartet, dass der Antikörper das vollständige NUDT5 und potenziell alle Isoformen, die diese Region enthalten, erkennt; validieren Sie dies immer in Ihrem Zell- oder Gewebesystem.
• Für Western Blot wird für monoklonale Antikörper üblicherweise eine Startverdünnung von 1:1000 verwendet, eine Optimierung mittels Verdünnungsreihe wird jedoch empfohlen.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC ist eine Permeabilisierung mit Triton X-100 oder einem ähnlichen Detergens erforderlich, um Zugang zum nukleären NUDT5 zu erhalten; Methanol-Fixierung kann ebenfalls die Antigenität erhalten.
• Eine Voradsorption mit dem immunisierenden Peptid kann in WB und IF/ICC als Spezifitätskontrolle dienen.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde berichtet; eine Sequenzalignment der N-terminalen Region kann jedoch helfen, die Reaktivität mit anderen Spezies vorherzusagen.
• Für ELISA wird eine direkte Beschichtung mit Antigen und eine Antikörpertitration empfohlen; erwägen Sie die Verwendung von rekombinantem NUDT5-Protein für Standardkurven.

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