Anti-NUDT16 Polyclonale Antikörper für WB, ELISA - Q96DE0

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von NUDT16

• NUDT16 ist ein multifunktionelles Enzym, annotiert als U8-snoRNA-Entkappungsenzym, und auch bekannt als IDP-Phosphatase (IDPase), Nudix-Hydrolase 16 und U8-snoRNA-bindendes Protein H29K.
• In seiner Funktion als RNA-Entkappungsenzym katalysiert NUDT16 die metallabhängige Spaltung der Kappenstruktur von U8-snoRNA und mRNAs, die für die Reifung der rRNA und den mRNA-Umsatz essenziell ist. Zugehörige Referenzen: PMID:20385596, PMID:26121039
• Das Enzym fungiert außerdem als Nukleotid-Desinfektionsmittel, das nicht-kanonische Purinnukleotide (IDP, dITP, GDP, dGDP, XDP, ITP, dITP) zu ihren Monophosphatformen hydrolysiert, mit einer Substratpräferenz IDP > dIDP >> GDP = dGDP > XDP = ITP = dITP, und verhindert so deren Einbau in Nukleinsäuren. Zugehörige Referenzen: PMID:20385596
• NUDT16 lokalisiert sich in mehreren Kompartimenten, darunter Zellkern, Nukleoplasma, Nukleolus und Zytoplasma, was seine vielfältigen Funktionen bei der RNA-Verarbeitung und dem Nukleotidstoffwechsel widerspiegelt.
• Das Protein ist weit verbreitet exprimiert, mit den höchsten Gehalten in Lunge, Niere, Nebenniere, Hoden, Herz und Gehirn.
• NUDT16 benötigt zweiwertige Metallionen wie Mangan oder Kobalt für die katalytische Aktivität und bindet GTP, ITP und XTP stark.
• Neben kanonischen Kappenstrukturen zeigt NUDT16 Entkappungsaktivität gegenüber NAD- und FAD-gecapten RNAs und Berichten zufolge auch gegenüber dpCoA-gecapten RNAs. Zugehörige Referenzen: PMID:32432673

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen zielt auf die Aminosäuren 60–130 innerhalb der Nudix-Domäne von menschlichem NUDT16 ab. Diese Region ist zwischen Mensch und Maus hoch konserviert, was mit den Kreuzreaktivitätsdaten übereinstimmt.
• Für den Western Blot-Nachweis verwenden Sie moderate Mengen an Ganzzelllysat aus menschlichen oder murinen Zelllinien (z. B. 20–30 µg) und sondieren Sie mit Standard-Chemilumineszenzprotokollen. Eine Bande nahe 21 kDa ist zu erwarten.
• In ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Capture- oder Nachweisreagenz dienen. Eine Optimierung der Beschichtungskonzentration und des gepaarten Nachweissystems wird empfohlen.
• Da NUDT16 in einigen Zelltypen ein niedrig exprimiertes Protein ist, kann eine Anreicherung von Kernfraktionen oder die Verwendung empfindlichererer Nachweisreagenzien das Signal verbessern.
• Für Funktionsstudien ist zu beachten, dass NUDT16 RNA und Metallionen bindet; der Antikörper erkennt wahrscheinlich das gesamte NUDT16 unabhängig von seinem Bindungszustand.

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