Anti-NSUN2 monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q08J23

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NSUN2-Funktion und -Lokalisierung

• NSUN2 (auch bekannt als Misu, SAKI, TRM4) ist eine RNA-Cytosin-C(5)-Methyltransferase, die die Bildung von 5-Methylcytosin (m5C) in tRNAs, mRNAs und langen nicht-kodierenden RNAs katalysiert und die RNA-Stabilität und -verarbeitung reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:17071714, PMID:22995836, PMID:31199786
• Es methyliert spezifische Cytosinreste in tRNA-Vorstufen, wie die Positionen 34 und 48 von tRNA(Leu)(CAA) und die Positionen 48, 49 und 50 von tRNA(Gly)(GCC), und ist für die Generierung von tRNA-abgeleiteten Fragmenten erforderlich. Verwandte Referenzen: PMID:17071714, PMID:22995836, PMID:31199786
• NSUN2 vermittelt auch die m5C-Modifikation mitochondrialer tRNAs. Verwandte Referenzen: PMID:31276587
• Es methyliert mRNAs, um die Stabilität durch YBX1-Erkennung zu erhöhen, und erleichtert den nukleozytoplasmatischen Transport durch ALYREF-Bindung. Verwandte Referenzen: PMID:22395603, PMID:31358969, PMID:34556860, PMID:28418038
• NSUN2 modifiziert nicht-kodierende RNAs, einschließlich Vault-RNAs (vtRNAs), und fördert deren Verarbeitung in kleine regulatorische RNAs, die an der epidermalen Differenzierung beteiligt sind. Verwandte Referenzen: PMID:23871666, PMID:31186410
• Neben seiner Methyltransferase-Aktivität ist NSUN2 für eine korrekte Spindelassembly und Chromosomensegregation während der Mitose erforderlich. Verwandte Referenzen: PMID:19596847
• NSUN2 lokalisiert im Zellkern, Nukleolus, Zytoplasma, Mitochondrium und an der Spindel und wird in extrazellulären Exosomen sezerniert.
• Es wird im adulten und fetalen Gehirn sowie in lymphoblastoiden Zellen exprimiert und ist an Prozessen wie der Differenzierung epidermaler Stammzellen und der Spermatogenese beteiligt.
• Krankheitsassoziierte Varianten in NSUN2 werden mit geistiger Behinderung in Verbindung gebracht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 617-708 von menschlichem NSUN2; erwägen Sie die Überprüfung der Antikörperspezifität durch Tests mit dem rekombinanten Immunogen oder Lysaten von Zellen mit bekannter NSUN2-Expression.
• Für den Western Blot wird eine Bande um 86 kDa erwartet; validieren Sie dies in menschlichen und murinen Zelllysaten, von denen bekannt ist, dass sie NSUN2 exprimieren (z. B. lymphoblastoide Zellen oder Hirngewebe).
• Optimieren Sie bei der Immunhistochemie und Immunfluoreszenz die Antigen-Retrieval- und Fixierungsprotokolle; die nukleäre und zytoplasmatische Lokalisierung von NSUN2 kann eine sorgfältige Permeabilisierung erfordern.
• Für die Immunpräzipitation bestätigen Sie die Kompatibilität mit nachgeschalteten Anwendungen; beachten Sie die potenzielle Assoziation von NSUN2 mit RNA- und Proteinkomplexen.
• Validieren Sie die Kreuzreaktivität in der vorgesehenen Spezies (Mensch, Maus) mithilfe von positiven und negativen Kontrollproben.

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