Anti-NRF2-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16236

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NRF2-Funktion und -Lokalisierung

• NRF2 (Nuclear factor erythroid 2-related factor 2, auch bekannt als NFE2L2) ist ein Transkriptionsfaktor, der vom NFE2L2-Gen kodiert wird, mit einem Molekulargewicht von ~68 kDa. Er gehört zur Familie der Cap'n'Collar-Basic-Region-Leucine-Zipper (CNC-bZIP).
• NRF2 spielt eine zentrale Rolle bei der zellulären Abwehr gegen oxidativen Stress, indem er an Antioxidans-Response-Elemente (ARE) in den Promotorregionen zytoprotektiver Gene, einschließlich Phase-2-Entgiftungsenzyme, bindet und so reaktive Elektrophile neutralisiert. Verwandte Referenzen: PMID:11035812, PMID:19489739, PMID:29018201
• Unter basalen Bedingungen wird NRF2 im Zytoplasma durch den KEAP1-CUL3-RBX1-E3-Ubiquitin-Ligase-Komplex ubiquitiniert und schnell abgebaut. Bei oxidativem oder elektrophilem Stress wird KEAP1 gehemmt, wodurch NRF2 akkumulieren, in den Kern translozieren, mit kleinen Maf-Proteinen heterodimerisieren und die Transkription von Zielgenen aktivieren kann. Verwandte Referenzen: PMID:11035812, PMID:15601839, PMID:29018201, PMID:19489739, PMID:29590092
• Selektive Autophagie aktiviert ebenfalls NRF2: Der Autophagie-Rezeptor SQSTM1/p62 interagiert mit KEAP1, sequestriert diesen und führt zur Inaktivierung von KEAP1, wodurch die nukleäre Akkumulation von NRF2 und die Expression zytoprotektiver Gene gefördert werden. Verwandte Referenzen: PMID:20452972
• Während der Unfolded Protein Response (UPR) wird NRF2 aktiviert und trägt zur Redox-Homöostase und zum Zellüberleben unter Stress im endoplasmatischen Retikulum bei.
• NRF2 unterdrückt die makrophagenvermittelte Entzündung, indem er die Transkription proinflammatorischer Zytokine blockiert und die Rekrutierung der RNA-Polymerase II in der Nähe proinflammatorischer Gene hemmt, unabhängig vom kanonischen Bindungsmotiv von NRF2 und den ROS-Spiegeln.
• NRF2 beschränkt virale Infektionen: Es unterdrückt die antivirale zytosolische DNA-Erkennung durch Hemmung der STING1-Expression und hemmt die Replikation mehrerer pathogener Viren (z. B. SARS-CoV-2, HSV-1, Vaccinia, Zika) über einen Mechanismus, der unabhängig von Typ-I-Interferonen ist. Verwandte Referenzen: PMID:30158636, PMID:33009401
• NRF2 ist weit verbreitet exprimiert, mit den höchsten Spiegeln in erwachsenem Muskel, Niere, Lunge, Leber und fetalem Muskel. Es lokalisiert sowohl im Zytoplasma als auch im Kern und shuttletdynamisch als Reaktion auf zelluläre Signale.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser polyklonale Antikörper wurde gegen ein rekombinantes Protein erzeugt, das den Aminosäuren 366-605 von humanem NRF2 entspricht und den C-terminalen Bereich zielt. Er kann sowohl Gesamt- als auch modifizierte Formen nachweisen; erwägen Sie die Überprüfung der Spezifität in Ihrem experimentellen System mittels Knockdown- oder Knockout-Kontrollen.
• Für Western Blotting wird eine Bande um 68 kDa erwartet. Posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung oder Ubiquitinierung können Bandenverschiebungen verursachen; optimieren Sie Ladekontrollen und Detektionsreagenzien.
• Bei IHC-P sind Antigen-Retrieval und Blockierungsschritte kritisch. Verwenden Sie positive Kontrollgewebe wie Leber oder Niere, die hohe NRF2-Spiegel exprimieren.
• Für IF/ICC sollten Permeabilisierungs- und Fixierungsbedingungen optimiert werden; die NRF2-Kerntranslokation unter oxidativem Stress kann durch den Vergleich von behandelten mit unbehandelten Zellen beurteilt werden.
• ELISA-Anwendungen können die Paarung mit einem geeigneten Sekundärantikörper oder die Verwendung des Antikörpers als Teil eines Sandwich-Paares beinhalten; validieren Sie mit rekombinantem Protein oder Zelllysaten.

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