Anti-NQO1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P15559

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NAD(P)H-Dehydrogenase [Chinon] 1 (NQO1) Funktion und Lokalisierung

• NQO1 (NAD(P)H-Dehydrogenase [Chinon] 1) ist ein flavinhaltiges Enzym, das die Zwei-Elektronen-Reduktion von Chinonen zu Hydrochinonen katalysiert und dabei entweder NADH oder NADPH als Elektronendonoren verwendet. Die Elektronen werden sequentiell von NAD(P)H auf den Flavin-Cofaktor und dann vom reduzierten Flavin auf das Chinon übertragen, wobei die Bildung von Semichinon und reaktiven Sauerstoffspezies umgangen wird. Verwandte Referenzen: PMID:8999809 PMID:9271353

• Das Enzym spielt eine zentrale Rolle in der zellulären Redox-Regulation, indem es Chinone entgiftet und Komponenten des Plasmamembran-Redox-Systems, wie Coenzym Q und Vitaminchinone, reduziert, um antioxidative Hydrochinon-Formen zu produzieren. Es kann als Superoxid-Fänger fungieren, um die Hydrochinon-Oxidation zu verhindern und die Ausscheidung zu erleichtern. Verwandte Referenzen: PMID:15102952 PMID:8999809 PMID:9271353

• NQO1 kann auch bestimmte Chinone und ihre Derivate aktivieren und dabei redoxreaktive Hydrochinone mit potenzieller DNA-Vernetzungs- und Antitumoraktivität erzeugen. Verwandte Referenzen: PMID:8999809

• Unter oxidativem Stress interagiert NQO1 in einer NADH-abhängigen Weise mit den Tumorsuppressoren TP53 und TP73 und hemmt deren Ubiquitin-unabhängigen Abbau durch das 20S-Proteasom. Verwandte Referenzen: PMID:15687255 PMID:28291250

• Das Protein ist im Zytoplasma und Zytosol lokalisiert.

• NQO1 ist ein Phosphoprotein, das posttranslationalen Modifikationen unterliegt, einschließlich Phosphorylierung, Isopeptidbindungsbildung und Ubiquitin-ähnlicher Konjugation, die seine Aktivität und Stabilität regulieren können.

• Alternatives Spleißen des NQO1-Gens erzeugt mehrere Transkriptvarianten, die möglicherweise zu verschiedenen Proteinisoformen führen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt die vollständige humane NQO1-Sequenz (Aminosäuren 1–274) ab, daher erkennt der Antikörper möglicherweise sowohl native als auch denaturierte Proteinformen in Anwendungen wie WB, IF/ICC und ELISA.
• Für WB sollte ein standardmäßiges reduzierendes denaturierendes Gel verwendet werden, und die detektierte Bande bei etwa 31 kDa sollte mit einem relevanten Zell- oder Gewebelysat validiert werden, von dem bekannt ist, dass es NQO1 exprimiert (z. B. Leber, Niere oder Krebszelllinien).
• Bei IF/ICC sollten geeignete Permeabilisierungs- und Fixierungsschritte eingeschlossen werden, um den Zugang zum zytosolischen Ziel zu gewährleisten; eine Kern-Gegengefärbung kann die Visualisierung der Lokalisierung unterstützen.
• Titrieren Sie den Antikörper für jede Anwendung und jedes biologische System und schließen Sie geeignete positive und negative Kontrollen ein, um die Spezifität zu bestätigen, insbesondere angesichts des Potenzials für mehrere Isoformen.

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