Anti-NQO1-polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA – P15559

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von NQO1

• NQO1 ist eine Flavin enthaltende Chinonreduktase, die die Zwei-Elektronen-Reduktion von Chinonen zu Hydrochinonen katalysiert, wobei NADH oder NADPH als Elektronendonatoren verwendet werden. Dadurch werden die Bildung schädlicher Semichinone und reaktiver Sauerstoffspezies umgangen (aufgrund von Ähnlichkeiten) (PubMed:8999809, PubMed:9271353). Zugehörige Referenzen: PMID:8999809 PMID:9271353

• Es reguliert den zellulären Redoxzustand, indem es Komponenten des Redoxsystems der Plasmamembran (z. B. Coenzym Q und Vitaminchinone) zu antioxidativen Hydrochinonen reduziert, und kann als Superoxidfängermolekül wirken (PubMed:15102952, PubMed:8999809, PubMed:9271353). Zugehörige Referenzen: PMID:15102952 PMID:8999809 PMID:9271353

• Umgekehrt kann NQO1 bestimmte Chinone und Derivate aktivieren, wodurch redoxreaktive Hydrochinone mit potenzieller DNA-vernetzender und antitumoraler Wirkung entstehen (PubMed:8999809). Zugehörige Referenzen: PMID:8999809

• Unter oxidativem Stress fungiert NQO1 als Gatekeeper des 20S-Kernproteasoms, indem es NADH-abhängig mit TP53 und TP73 interagiert und deren Ubiquitin-unabhängigen Abbau hemmt (PubMed:15687255, PubMed:28291250). Zugehörige Referenzen: PMID:15687255 PMID:28291250

• Das Enzym ist hauptsächlich im Zytoplasma/Zytosol lokalisiert (SUBCELLULAR LOCATION).

• NQO1 unterliegt alternativem Spleißen, Phosphorylierung und Ubiquitin-ähnlicher Konjugation, wie durch die UniProt-Schlüsselwörter angegeben.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht dem vollständigen humanen NQO1 (1–274), was darauf hindeutet, dass der Antikörper mehrere Epitope erkennen kann. Zur Bestätigung der Spezifität sollten eine Peptidblockierung oder Knockout-Kontrollen in Betracht gezogen werden.
• Beim Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 31 kDa. Die Validierung sollte in relevanten Zell- oder Gewebelysaten erfolgen. Zu beachten ist, dass posttranslationale Modifikationen geringfügige Verschiebungen der Banden verursachen können.
• Bei der Immunhistochemie (Paraffin) sollten die Bedingungen für die Antigenfreilegung aufgrund der zytoplasmatischen Lokalisation von NQO1 optimiert werden.
• Für Immunfluoreszenz/ICC wird ein zytosolisches Färbemuster erwartet. Geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsschritte sollten eingeschlossen werden.
• Bei ELISA-Anwendungen kann dieser polyklonale Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz eingesetzt werden. Für quantitative Sandwich-Assays wird die Kombination mit einem passenden monoklonalen Antikörper empfohlen.

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