Anti-NPC2 (HE1, EDDM1) polyklonaler Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P61916

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von NPC2

• NPC2 (auch bekannt als HE1, EDDM1) ist ein intrazellulärer Cholesterintransporter, der eine entscheidende Rolle beim Ausfluss von Cholesterin aus dem lysosomalen Kompartiment spielt.
• Es wirkt gemeinsam mit NPC1; Cholesterin, das von LDLs in späten Endosomen/Lysosomen freigesetzt wird, wird von NPC2 zur Cholesterinbindungstasche von NPC1 transportiert.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:17018531 PMID:18772377 PMID:27238017
• NPC2 bindet Cholesterin im Verhältnis 1:1 und kann auch eine Vielzahl anderer Sterole binden, darunter auch Pflanzensterole.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:17018531
• Die sezernierte Form von NPC2 reguliert die biliäre Cholesterinsekretion durch Stimulation des ABCG5/ABCG8-vermittelten Transports.
• Subzellulär ist NPC2 im Lysosom und Endoplasmatischen Retikulum zu finden und wird sezerniert.
• Es wird in mehreren Geweben nachgewiesen, darunter Gallenblasengalle, Fibroblasten, Niere, Leber, Milz, Dünndarm, Plazenta, Hoden und Nebenhoden.
• Das Protein enthält ein Signalpeptid und weist posttranslationale Modifikationen wie Disulfidbindungen, Glykosylierung und Acetylierung auf; Mutationen in NPC2 sind mit der Niemann-Pick-Krankheit Typ C2 verbunden.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Der Antikörper wurde gegen ein rekombinantes Fusionsprotein gerichtet, das die Aminosäuren 20–151 des humanen NPC2 umfasst – dies entspricht dem vollen reifen Protein nach Abspaltung des Signalpeptids. Dieses Design soll die Erkennung von endogenem NPC2 sicherstellen.
• Für das Western Blotting erwarten Sie eine Bande bei etwa 17 kDa; validieren Sie den Antikörper in Positivkontroll-Lysaten (z. B. menschliche Fibroblasten oder Nierengewebe) und erwägen Sie die Verwendung eines Reduktionsmittels aufgrund der vorhandenen Disulfidbindungen.
• Schließen Sie bei IHC-P- oder IF-P-Anwendungen geeignete Antigen-Retrieval-Schritte ein und überprüfen Sie die Färbung an Gewebeschnitten, die bekanntermaßen NPC2 exprimieren (wie Niere oder Hoden).
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus- und Ratten-NPC2; dennoch sollte die Sequenzhomologie zwischen den Spezies für spezifische Epitope überprüft und der Antikörper im jeweiligen experimentellen Modell validiert werden.

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