Anti-NPB-polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – Q8NG41

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Neuropeptid B

• Neuropeptid B (NPB) ist ein Präproprotein, das einer proteolytischen Prozessierung unterliegt und dabei das reife Neuropeptid bildet, das zur Neuropeptid-B/W-Familie gehört.
• Es könnte an der Regulation des Fressverhaltens, der Funktion des neuroendokrinen Systems sowie an Aspekten von Gedächtnis und Lernen beteiligt sein.
• NPB wurde mit dem afferenten Schmerzweg in Verbindung gebracht, was auf eine Rolle bei der Schmerzwahrnehmung oder -modulation hindeutet.
• Das Protein wird sezerniert und ist weitverbreitet im zentralen Nervensystem exprimiert, mit hohen Konzentrationen in der Substantia nigra, im Hypothalamus, Hippocampus, Rückenmark, in der Plazenta und im fetalen Gehirn.
• Eine geringere Expression wird in Hoden, Uterus und Eierstock festgestellt; bemerkenswerterweise findet sich auch eine hohe Expression in kolorektalen Adenokarzinomen, was auf eine potenzielle Beteiligung an Krebserkrankungen hindeutet.
• Der UniProt-Eintrag klassifiziert NPB unter anderem anhand der Schlüsselwörter „Spaltung an einem Paar basischer Aminosäurereste“, „direkte Proteinsequenzierung“ und „Neuropeptid“. Dies spiegelt die Prozessierung des reifen Peptids und seine funktionelle Charakterisierung wider.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 1–125 des vollständigen humanen NPB und deckt somit das gesamte Präproprotein ab; daher kann der Antikörper sowohl unverarbeitete als auch prozessierte Formen erkennen. Forschende sollten die Größe der im Western Blot detektierten Bande überprüfen, die bei einer Spaltung im experimentellen System dem vorhergesagten Molekulargewicht des prozessierten Neuropeptids entsprechen kann.
• Für den Western Blot (WB) sollten reduzierende Bedingungen und geeignete Ladekontrollen aus Geweben mit bekannter NPB-Expression verwendet werden, beispielsweise aus Gehirnregionen wie dem Hypothalamus. Der Primärantikörper sollte titriert werden, um ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis zu erzielen.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) sollten die Permeabilisierungs- und Fixierungsbedingungen optimiert werden, insbesondere da das Zielprotein sezerniert wird, um intrazelluläre Prozessierungsintermediate oder ein extrazelluläres Signal nachzuweisen.
• Der Antikörper ist für ELISA geeignet; nach einer Validierung der Kombination kann er als Fang- oder Detektionsreagenz in einem Sandwich-ELISA eingesetzt werden. Die Kreuzreaktivität mit Maus deutet auf eine Sequenzkonservierung hin; sofern möglich, sollte die Spezifität anhand von Knockout-Kontrollen validiert werden.

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