Anti-NOX2/gp91phox Poliklonale Antikörper für WB, ELISA – P04839

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von NOX2/gp91phox

• NOX2/gp91phox, auch bekannt als CYBB oder NADPH-Oxidase 2, ist die schwere katalytische Untereinheit des Phagozyten-Cytochrom-b-245-Komplexes.
• Katalytische Untereinheit, die den Elektronentransfer von zytosolischem NADPH zu O2 vermittelt, um Superoxidanion zu produzieren – ein Vorläufer reaktiver Sauerstoffspezies, der für die Abtötung von Mikroben entscheidend ist (PubMed:15338276, PubMed:36241643, PubMed:36413210). Zugehörige Referenzen: PMID:15338276 PMID:36241643 PMID:36413210
• Der Elektronentransfer umfasst die sequenzielle Reduktion von FAD und zwei Häm-Kofaktoren zur Reduktion von O2 (PubMed:38355798). Zugehörige Referenzen: PMID:38355798
• Die Aktivierung erfordert die Assemblierung zytosolischer Untereinheiten (z. B. p47-phox/NCF1) mit dem membrangebundenen Cytochrom b-245, ausgelöst durch Phosphorylierung und Membrantranslokation (PubMed:19028840, PubMed:38355798). Zugehörige Referenzen: PMID:19028840 PMID:38355798
• Lokalisiert hauptsächlich an der Zellmembran und Phagosomenmembran von Phagozyten.
• Nachweisbar in Neutrophilen, wo es eine zentrale Rolle im respiratorischen Burst spielt.
• Mutationen in CYBB verursachen die X-chromosomale chronische Granulomatose (CGD), die durch eine defekte Superoxidproduktion und wiederkehrende Infektionen gekennzeichnet ist.
• Enthält FAD- und NADPH-Bindungsdomänen sowie zwei Häme; ist N-glykosyliert und wird durch Phosphorylierung und Ubiquitinierung reguliert.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 101-200 von humanem NOX2/gp91phox entspricht; der resultierende polyklonale Antikörper kann mehrere Epitope innerhalb dieser Region erkennen. Es wird empfohlen, die Spezifität mit positiven (z. B. Neutrophilen-Lysate) und negativen Kontrollen zu validieren.
• Für das Western Blotting ist eine Hauptbande um 65 kDa für die nicht glykosylierte Form zu erwarten; zusätzliche Banden bei höheren Molekulargewichten können glykosylierten Spezies (gp91phox) entsprechen. Optimieren Sie Blockierungs- und Nachweisbedingungen entsprechend.
• Es wurde eine Kreuzreaktivität des Antikörpers mit Maus und Ratte berichtet; aufgrund von Sequenzvariationen bestätigen Sie jedoch die Reaktivität in Ihrem spezifischen Modellsystem.
• Bei ELISA-Anwendungen erwägen Sie Peptid-Konkurrenz-Assays zur Beurteilung der Spezifität.
• Da das Ziel ein Transmembranprotein ist, kann die Zugabe milder Detergenzien zu Lysepuffern die Solubilisierung verbessern.

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