Anti-NOTCH4-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q99466

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von NOTCH4

• NOTCH4 (Neurogenic locus notch homolog protein 4) ist ein Mitglied der Notch-Familie von Transmembranrezeptoren, die Schlüsselregulatoren der Zelldeterminierung sind.
• Es fungiert als Rezeptor für membrangebundene Liganden Jagged1, Jagged2 und Delta1 und vermittelt kurzreichweitige Zell-Zell-Kommunikation.
• Nach Ligandenbindung wird die intrazelluläre Domäne (NICD) gespalten und in den Kern transloziert, wo sie einen transkriptionellen Aktivatorkomplex mit RBPJ/RBPSUH bildet, um Zielgene zu aktivieren.
• Die NOTCH4-Signalgebung moduliert vielfältige zelluläre Prozesse einschließlich Differenzierung, Proliferation und Apoptose mit einer potenziellen Rolle bei der morphogenetischen Verzweigung von Blutgefäßen (nach Ähnlichkeit).
• Das Protein ist an der Zellmembran lokalisiert und nach Aktivierung im Kern.
• Die NOTCH4-Expression ist gewebsspezifisch: hoch exprimiert im Herzen, mäßig in Lunge und Plazenta und auf niedrigem Niveau in mehreren anderen Geweben; sie fehlt im Gehirn von Erwachsenen und in peripheren Blutzellen.
• Strukturell enthält NOTCH4 mehrere EGF-ähnliche Wiederholungen, ANK-Wiederholungen und andere für Notch-Rezeptoren typische Domänen; es unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Glykosylierung und Phosphorylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Protein, das den C-terminalen Bereich (aa 1824-2003) von humanem NOTCH4 abdeckt, was sowohl die Volllänge als auch die gespaltene intrazelluläre Domäne erkennen kann.
• Für Western Blotting kann eine Bande von ~210 kDa, die der Volllänge von NOTCH4 entspricht, beobachtet werden; aufgrund der proteolytischen Verarbeitung können jedoch zusätzliche niedermolekulare Banden auftreten. Eine Validierung im entsprechenden Probenystem wird empfohlen.
• Bei der Immunzytochemie/Immunfluoreszenz (IF/ICC) ist bei unstimulierten Zellen eine Membranlokalisation und nach Ligandenaktivierung eine Färbung von Membran und Kern zu erwarten.
• Der Antikörper eignet sich auch für ELISA-Anwendungen zum Nachweis oder Capture von NOTCH4.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde berichtet, aber die Leistung sollte unter spezifischen experimentellen Bedingungen überprüft werden.

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