Anti-NOTCH2 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q04721

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: NOTCH2-Funktion und -Lokalisierung

• NOTCH2 (Neurogenic locus notch homolog protein 2), auch bekannt als AGS2, HJCYS, hN2, ist ein großer Single-Pass Typ-I-Transmembranrezeptor, der eine zentrale Rolle im Notch-Signalweg spielt und die Zellfatsentscheidungen steuert.
• Nach Bindung durch membrangebundene Liganden wie Jagged-1, Jagged-2 oder Delta-1 wird die intrazelluläre Domäne (NICD) freigesetzt und in den Kern transloziert, wo sie einen transkriptionellen Aktivatorkomplex mit RBPJ bildet, um Zielgene wie den Enhancer of split locus zu induzieren. Verwandte Referenzen: PMID:21378985 PMID:21378989
• NOTCH2 gehört zur NOTCH-Rezeptorfamilie, die durch mehrere extrazelluläre EGF-ähnliche Wiederholungen und intrazelluläre Ankyrin-(ANK)-Wiederholungen gekennzeichnet ist, die beide für die Ligandenbindung und Signaltransduktion essentiell sind.
• Subzellulär lokalisiert NOTCH2 an der Zellmembran; nach Aktivierung tritt die NICD in den Kern ein, und das Protein wird auch im Zytoplasma nachgewiesen.
• Das Protein unterliegt Glykosylierung und Phosphorylierung, enthält Disulfidbrücken und ist ein Phosphoprotein; laut UniProt-Schlüsselwörtern wird es unter Transkriptionsregulation, Entwicklungsprotein und Glykoprotein klassifiziert.
• NOTCH2 ist weit verbreitet exprimiert, mit hohen Spiegeln in Gehirn, Herz, Niere, Lunge, Skelettmuskel und Leber und zeigt eine ubiquitäre Expression während der embryonalen Entwicklung.
• In der Osteoklastenbiologie arbeitet NOTCH2 mit RELA/p65 zusammen, um die NFATc1-Promotoraktivität zu verstärken, die RANKL-induzierte Differenzierung zu fördern, und unterstützt auch die Selbsterneuerung von Leberkrebszellen. Verwandte Referenzen: PMID:29149593 PMID:25985737

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen erstreckt sich über die Aminosäuren 1697–1819 innerhalb der zytoplasmatischen Region von humanem NOTCH2. Diese Sequenz ist über Mensch, Maus und Ratte hoch konserviert, was eine breite Reaktivität unterstützt.
• Für Western Blots ist ein Band nahe 265 kDa für das全长-NOTCH2 zu erwarten; Spaltprodukte können bei niedrigeren Molekulargewichten auftreten. Eine Validierung in NOTCH2-exprimierenden Zelllinien (z. B. Leberkrebs- oder Osteoklastenmodelle) ist ratsam.
• Bei der Immunfluoreszenz/ICC kann die Epitop-Zugänglichkeit eine Permeabilisierung für die intrazelluläre Detektion erfordern; die Kernlokalisation kann unter entsprechenden Liganden-AKTIVIERUNGSbedingungen visualisiert werden.
• Bei Verwendung in ELISA kann der Antikörper als Erfassungs- oder Nachweisreagenz für humanes, murines oder rattiges NOTCH2 dienen, aber optimale Beschichtungskonzentrationen sollten empirisch bestimmt werden.

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