Anti-Notch1 monoklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - P46531

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Notch1-Funktion und -Lokalisierung

• Neurogene Locus-Notch-Homolog-Protein 1 (Notch1) ist ein Transmembranrezeptor, der die Zell-Zell-Kommunikation vermittelt, um Entscheidungen über das Zellschicksal, Differenzierung, Proliferation und Apoptose zu regulieren.
• Fungiert als Rezeptor für membrangebundene Liganden Jagged-1, Jagged-2 und Delta-1; nach Ligandenbindung wird die intrazelluläre Domäne von Notch (NICD) freigesetzt und in den Kern transloziert, wo sie einen transkriptionellen Aktivatorkomplex mit RBPJ bildet, um die Expression von Zielgenen anzutreiben.
• Beteiligt an der Angiogenese durch negative Regulation der Proliferation, Migration und angiogenen Sprossung von Endothelzellen.
• Essenziell für die T-Zell-Reifung im Thymus und trägt zur Entwicklung von CD4+- und CD8+-Zellen bei.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst die Zellmembran, die Membran der späten Endosomen und den Zellkern, was die proteolytische Aktivierung und die Signaldynamik widerspiegelt.
• In fetalen Geweben am reichlichsten in Milz, Hirnstamm und Lunge vorhanden; bei Erwachsenen vorwiegend in lymphatischen Geweben zu finden.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, Glykosylierung, Hydroxylierung und Ubiquitinierung, wie durch Schlüsselwörter angegeben.
• Spielt eine Rolle bei der Bestimmung der Links-Rechts-Symmetrie und der Funktion der Cilien am Links-Rechts-Organisator.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen liegt innerhalb der intrazellulären Domäne (aa 2456-2555), sodass der Antikörper sowohl das全长-Notch1 als auch das freigesetzte NICD erkennen sollte. Überprüfen Sie die Detektion der erwarteten Bänder im Western Blot.
• Verwenden Sie für WB ein Polyacrylamidgel mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6–8 %), um das hochmolekulare Protein (~273 kDa) aufzulösen. Es kann eine verlängerte Übertragung erforderlich sein.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus-Notch1 wurde berichtet; validieren Sie die Detektion in Mausgewebe oder Zelllysaten, falls erforderlich.
• Verwenden Sie für IP milde Lysebedingungen, um Protein-Protein-Interaktionen aufrechtzuerhalten, wenn Sie Komplexe untersuchen.
• Da es sich um einen kaninchen-monoklonalen Antikörper handelt, können Sie eine hohe Spezifität und Chargen-zu-Chargen-Konsistenz erwarten; titrieren Sie ihn immer für die optimale Verdünnung in Ihren Assays.

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