Anti-NONO/p54nrb polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA – Q15233

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von NONO/p54nrb

• NONO/p54nrb, auch bekannt als p54nrb, NMT55, NRB54 oder PPP1R114, ist ein 54 kDa großes nukleäres RNA- und DNA-bindendes Protein.
• Es bindet doppelsträngige DNA an Oktamersequenzen und interagiert über unterschiedliche Bindungsstellen auch mit einzelsträngiger DNA und RNA. Zugehörige Referenzen: PMID:11525732, PMID:12403470, PMID:26571461
• Als Heterodimer mit SFPQ ist es an dem Prä-mRNA-Spleißen beteiligt und assoziiert mit U5 snRNA. Zugehörige Referenzen: PMID:12403470
• Gemeinsam mit PSPC1 ist NONO essenziell für die Bildung von nukleären Paraspeckeln, die defekte RNAs sequestrieren. Zugehörige Referenzen: PMID:22416126
• Der SFPQ-NONO-Komplex erleichtert die Reparatur von DNA-Doppelstrangbrüchen über nicht homologe Endverknüpfung (NHEJ) und stabilisiert DNA-Enden. Zugehörige Referenzen: PMID:15590677
• NONO reguliert die Transkription, unter anderem die Repression des zirkadianen CLOCK-BMAL1-Heterodimers (durch Ähnlichkeit) und die Aktivierung von Promotoren für intrazisternale A-Partikel.
• In der angeborenen Immunität assembliert NONO in den HDP-RNP-Komplex, um die IRF3-Phosphorylierung und die Aktivierung des cGAS-STING-Signalwegs zu fördern, mit einer spezifischen Rolle bei der Erkennung einer HIV-2-Infektion. Zugehörige Referenzen: PMID:28712728, PMID:30270045
• Es ist in vielen Geweben breit exprimiert und lokalisiert im Zellkern, Nukleolus, in nukleären Speckeln und auf Chromosomen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den N-terminalen 300 Aminosäuren von humanem NONO/p54nrb. Diese Region kann bei gängigen Isoformen vorliegen; überprüfen Sie die Spezifität in Ihrem Zielgewebe oder Ihrer Zielzelllinie anhand von Knockdown- oder Knockout-Kontrollen.
• Für das Western Blotting beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ca. 54 kDa. Verwenden Sie eine geeignete Gelprozentanteil und Transferbedingungen. Blockierung und Antikörperverdünnung sollten für den Probentyp optimiert werden.
• Bei Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) können Methoden zur Antigen-Retrieval und Permeabilisierung die Detektion beeinflussen; testen Sie Citrat- oder EDTA-basiertes Antigen-Retrieval und Permeabilisierung mit Triton X-100.
• Für ELISA-Anwendungen sollten beschichtetes Antigen und Detektionsbedingungen empirisch ermittelt werden.
• Kreuzreaktivität ist für Mensch, Maus und Ratte nachgewiesen; dennoch sollte die Sequenzhomologie bei anderen Spezies für Ihr Modell überprüft werden.
• Als polyklonaler Antikörper kann die Charge-to-Charge-Konsistenz variieren; konsistente Ergebnisse können durch Verwendung derselben Charge für vergleichende Experimente erzielt werden.

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