Anti-NOL3-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O60936

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Nucleolar protein 3 (NOL3)

• NOL3 (Nucleolar protein 3), auch bekannt als Apoptose-Repressor mit CARD (ARC) oder Nop30, ist ein multifunktionelles Protein, das beim Menschen durch das NOL3-Gen kodiert wird. Es gehört zur Familie der Apoptose-Repressoren und enthält eine CARD-Domäne.
• NOL3 blockiert den extrinsischen Apoptoseweg, indem er die Bildung des death-inducing signaling complex (DISC) durch Wechselwirkungen mit FAS und FADD stört und die Verfügbarkeit von CASP8 durch eine phosphorylierungsabhängige mitochondriale Lokalisierung begrenzt (nach Ähnlichkeit).
• Im intrinsischen Weg bindet NOL3 direkt an BAX, verhindert dessen Aktivierung, die mitochondriale Dysfunktion und die Freisetzung pro-apoptotischer Faktoren. Verwandte Referenzen: PMID:15004034
• NOL3 wirkt als zytosolischer Calcium-Puffer, dissociiert sich von CASP8, um das Calcium-Gleichgewicht aufrechtzuerhalten, und hemmt so den calciumvermittelten Zelltod. Verwandte Referenzen: PMID:15509781
• Zusätzliche anti-apoptotische Rollen umfassen die Unterdrückung der durch oxidativen Stress induzierten Apoptose (durch Blockierung der CASP2-Aktivierung und BAX-Translokation), der durch Hypoxie induzierten Apoptose (Hemmung der Cytochrom-c-Freisetzung) und des durch TNF induzierten Nekrose (durch Aufhebung der Rekrutierung von RIPK1 an Komplex I) (nach Ähnlichkeit).
• Zur subzellulären Lokalisierung gehören Nucleolus, Zytoplasma, Mitochondrien, sarkoplasmatisches Retikulum und Membran, was den vielfältigen Funktionen beim RNA-Spleißen und Zelltod entspricht.
• Gewebsspezifität: hohe Expression in Herz und Skelettmuskel; nachweisbar in geringen Mengen in Plazenta, Leber, Niere und Bauchspeicheldrüse.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot (WB) wird unter reduzierten denaturierenden Bedingungen eine spezifische Bande bei ca. 23 kDa erwartet. Herz- oder Skelettmuszellysate werden als positive Kontrollen empfohlen.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) ist möglicherweise eine Antigen-Retrieval erforderlich. Eine positive Färbung sollte in Kardiomyozyten oder Skelettmuskelfasern beobachtet werden; erwägen Sie die Verwendung von Isotypkontrollen, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) beachten Sie, dass NOL3 sowohl eine nukleäre als auch eine zytoplasmatische Färbung zeigt. Eine Co-Färbung mit Organellmarkern (z. B. Mitotracker für Mitochondrien) kann helfen, die subzelluläre Zielgebung zu bestätigen.
• Bei der Einrichtung eines ELISA kann das vollständige rekombinante Immunogen als Standard dienen; die Antikörperverdünnung sollte empirisch für das spezifische Assay-Format optimiert werden.
• Aufgrund der polyklonalen Natur sollte die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz überwacht werden; eine anfängliche Validierung im relevanten Probensystem wird vor großangelegten Studien empfohlen.

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