Anti-nNOS Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IF-P, ELISA – P29475

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von nNOS

• nNOS (Stickoxidsynthase 1) ist ein konstitutiv exprimiertes Enzym, das hauptsächlich für die Produktion von Stickoxid (NO) in Neuronen verantwortlich ist. Dort fungiert NO als Neurotransmitter und retrograder Botenstoff im Nervensystem.
• Über die neuronale Signalübertragung hinaus weist nNOS Peptidyl-Cystein-S-Nitrosylase-Aktivität auf, die die Cystein-S-Nitrosylierung von cytoplasmatischen Zielproteinen wie SRR vermittelt und damit zur posttranslationalen Regulation beiträgt.
• Kodiert durch das NOS1-Gen entstehen durch alternatives Spleißen mehrere Isoformen; Isoform 1 ist ubiquitärexprimiert (Gehirn, Skelettmuskel, Hoden, Lunge, Niere), während Isoform 3 hodenspezifisch ist und Isoform 4 in Hoden, Skelettmuskel, Lunge und Niere nachgewiesen wird.
• Subzellulär lokalisiert sich nNOS an der Zellmembran, einschließlich des Sarkolemm in Muskelzellen, und an dendritischen Dornen in Neuronen, was es für eine präzise Signalübertragung positioniert.
• Das Protein ist ein Häm-haltiges Flavoprotein, das Calmodulin, FAD, FMN, NADPH und Eisen bindet und für seine Oxidoreduktase-Aktivität mehrere Kofaktoren benötigt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität, Stabilität oder Lokalisation regulieren können.
• Als Schlüsselenzym der Stickoxidsignalübertragung ist nNOS an Neurotransmission, synaptischer Plastizität und Muskelkontraktilität beteiligt.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem C-terminalen Peptid (AA 1335–1434), einer Region, die bei Mensch, Maus und Ratte konserviert ist, was mit der berichteten Kreuzreaktivität übereinstimmt; erwägen Sie eine Sequenzalignment, wenn Sie den Antikörper bei anderen Spezies einsetzen.
• Für den Western Blot (WB) kann das hohe Molekulargewicht von nNOS (~161 kDa) verlängerte Transferzeiten und einen optimierten Gelprozentsatz erfordern; validieren Sie die Detektion in relevantem Gewebe oder Zelllysaten.
• Bei Immunfluoreszenz (IF)-Anwendungen erwarten Sie eine Färbung an der Zellmembran, am Sarkolemm oder an dendritischen Dornen; eine Co-Färbung mit kompartimentspezifischen Markern kann die Lokalisation erleichtern.
• Für ELISA sollten Standardprotokolle auf Peptid- oder Proteinbasis anwendbar sein; überprüfen Sie die Spezifität mit rekombinantem nNOS oder einem kompetitiven Peptid-Blockierungsassay, wenn nicht-spezifische Signale ein Problem darstellen.
• Als Kaninchen-monoklonaler Antikörper bietet er hohe Chargenkonsistenz; dennoch sollte jede neue Charge im vorgesehenen Assaysystem titriert werden.

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