Anti-NNMT Rabbit PolymAb® für WB - P40261

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NNMT-Funktion und -Lokalisierung

• NNMT (Nicotinamide N-methyltransferase) katalysiert die N-Methylierung von Nicotinamid unter Verwendung von S-Adenosyl-L-Methionin und produziert N1-Methylnicotinamid. Diese Reaktion ist ein vorherrschender Weg für den Abbau von Nicotinamid/Vitamin B3. Verwandte Referenzen: PMID:21823666, PMID:23455543, PMID:8182091
• Durch den Verbrauch von S-Adenosyl-L-Methionin reguliert NNMT das zelluläre Methylierungspotenzial und führt zu einer globalen Hypomethylierung repressiver Histonmarkierungen wie H3K27me3. Diese Aktivität vermittelt weitreichende epigenetische und transkriptionelle Veränderungen. Verwandte Referenzen: PMID:23455543, PMID:26571212, PMID:31043742
• In einem entwicklungsbiologischen Kontext trägt NNMT zu den niedrigen Spiegeln repressiver Histonmodifikationen bei, die pluripotente embryonale Stammzellen während des Präimplantationsstadiums charakterisieren. Verwandte Referenzen: PMID:26571212
• NNMT wirkt auch als metabolischer Regulator im weißen Fettgewebe (Energieverbrauch und Polyaminfluss) und in der Leber (Gluconeogenese und Cholesterinbiosynthese). Über sein Produkt N1-Methylnicotinamid kann es die SIRT1-Deacetylase stabilisieren und die Proteinacetylierung regulieren.
• Das Enzym kann andere strukturell mit Nicotinamid verwandte Pyridine N-methylieren, was auf eine Rolle bei der Fremdstoffentgiftung hindeutet. Verwandte Referenzen: PMID:30044909
• NNMT wird hauptsächlich in der Leber exprimiert, mit geringeren Spiegeln in Niere, Lunge, Skelettmuskel, Plazenta und Herz. Es wird nicht im Gehirn oder in der Bauchspeicheldrüse nachgewiesen.
• Das Protein lokalisiert im Zytoplasma und gehört zur Familie der Methyltransferasen, die S-Adenosyl-L-Methionin als Methyldonor verwenden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 1-264 des humanen NNMT in voller Länge ab und bietet eine breite Epitoperkennungsregion. Berücksichtigen Sie dies bei der Planung von Trunkierungs- oder Domänenkartierungsexperimenten.
• Für den Western Blot (WB) ist eine Bande bei etwa 30kDa zu erwarten. Validieren Sie dies im relevanten Probensystem und verwenden Sie geeignete denaturierende und reduzierende Bedingungen für eine optimale Detektion.
• Für die Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) empfehlen wir, Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle basierend auf dem Zielzelltyp zu optimieren, um die zytoplasmatische Lokalisierung zu erhalten.
• Bei Immunpräzipitations-Assays (IP) gewährleistet das monoklonale Kaninchenformat eine hohe Spezifität und Kompatibilität mit Standard-IP-Protokollen.
• Für ELISA kann dieser Antikörper sowohl im direkten als auch im Capture-Format verwendet werden. Erwägen Sie eine Titration der Antikörperkonzentration, um das optimale Signal-Rausch-Verhältnis zu ermitteln.
• Die Kreuzreaktivität ist für humanes, murines und ratten-NNMT bestätigt. Für andere Spezies überprüfen Sie bitte vorher die Sequenzhomologie.

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