Anti-NNMT-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF-P, ELISA – P40261

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von NNMT

• NNMT ist eine zytoplasmatische Methyltransferase, die die N-Methylierung von Nicotinamid katalysiert. Dabei wird S-Adenosyl-L-methionin (SAM) als Methylgruppendonor verwendet, wodurch N1-Methylnicotinamid (MNA) und S-Adenosyl-L-homocystein (SAH) entstehen. Dies stellt einen wichtigen Abbauweg für Nicotinamid/Vitamin B3 dar. Verwandte Referenzen: PMID:21823666 PMID:23455543 PMID:8182091
• Durch den Verbrauch von SAM reduziert NNMT das zelluläre Methylierungspotenzial und begrenzt direkt die Verfügbarkeit von SAM für andere Methyltransferasen. Diese Aktivität vermittelt aktiv eine epigenetische Reprogrammierung im gesamten Genom, insbesondere durch die Hypomethylierung repressiver Histonmarkierungen wie H3K27me3. Verwandte Referenzen: PMID:23455543 PMID:26571212 PMID:31043742
• Während der frühen Entwicklung trägt NNMT zu den niedrigen Konzentrationen repressiver Histonmarkierungen bei, die den pluripotenten Zustand embryonaler Stammzellen vor der Implantation charakterisieren. Verwandte Referenzen: PMID:26571212
• NNMT fungiert im weißen Fettgewebe als Stoffwechselregulator und beeinflusst den Energieverbrauch, die hepatische Glukoneogenese und die Cholesterinbiosynthese. In weißen Adipozyten reguliert NNMT den Polyaminfluss und steuert durch den Verbrauch von Nicotinamid über den Salvage-Weg die NAD+-Spiegel.
• Das Produkt N1-Methylnicotinamid reguliert außerdem die Proteinacetylierung in Hepatozyten, indem es die Ubiquitinierung unterdrückt und die Stabilität der SIRT1-Deacetylase erhöht.
• NNMT kann auch andere Pyridinverbindungen, die strukturell mit Nicotinamid verwandt sind, N-methylieren, was auf eine Beteiligung an der Entgiftung von Xenobiotika hindeutet. Verwandte Referenzen: PMID:30044909
• Subzelluläre Lokalisation: NNMT befindet sich überwiegend im Zytoplasma.
• Gewebeexpression: NNMT wird überwiegend in der Leber exprimiert, mit niedrigeren Konzentrationen in Niere, Lunge, Skelettmuskel, Plazenta und Herz. Im Gehirn oder in der Bauchspeicheldrüse ist NNMT nicht nachweisbar.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Dieser polyklonale Kaninchenantikörper wurde gegen rekombinantes humanes NNMT in voller Länge (Aminosäuren 1–264) erzeugt. Auf Grundlage der Daten zur Kreuzreaktivität ist zu erwarten, dass er das endogene Protein in Proben von Mensch, Maus und Ratte nachweist.
• Für den Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von NNMT etwa 30 kDa. Bei der Analyse von Gewebelysaten sollte ein geeigneter Gelprozentsatz sowie geeignete Ladekontrollen verwendet werden, insbesondere bei Lebergewebe, in dem NNMT stark exprimiert wird.
• Für Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF-P) sollte das Färbemuster in Geweben validiert werden, von denen bekannt ist, dass sie NNMT exprimieren, beispielsweise in Leberschnitten. Außerdem sollten geeignete Negativkontrollen eingeschlossen werden, um die Spezifität zu bestätigen.
• Bei ELISA-Anwendungen sollten das Beschichtungsantigen und die Antikörperkonzentration optimiert werden, um die gewünschte Sensitivität zu erzielen.
• Aufgrund der Rolle von NNMT bei Methylierung und Epigenetik kann dieser Antikörper für die Untersuchung von Veränderungen der NNMT-Expression unter verschiedenen metabolischen oder entwicklungsbezogenen Bedingungen nützlich sein.

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