Anti-NNMT Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P40261

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NNMT-Funktion und -Lokalisierung

• NNMT ist ein cytoplasmatisches Methyltransferase, das die N-Methylierung von Nicotinamid katalysiert, ein entscheidender Schritt bei der Clearance von Vitamin B3 (Nicotinamid), wobei S-Adenosyl-L-Methionin (SAM) als Methylgruppendonor verwendet wird.
  Verwandte Referenzen: PMID:21823666 PMID:23455543 PMID:8182091
• Durch den Verbrauch von SAM reguliert NNMT das zelluläre Methylierungspotenzial und vermittelt epigenetische Modifikationen, insbesondere durch Reduzierung des repressiven Histonomarks H3K27me3, wodurch globale transkriptionelle Veränderungen gefördert werden.
  Verwandte Referenzen: PMID:23455543 PMID:26571212 PMID:31043742
• NNMT trägt zum pluripotenten Zustand von embryonalen Stammzellen bei, indem es die H3K27me3-Spiegel begrenzt, was für die präimplantative epigenetische Landschaft charakteristisch ist.
  Verwandte Referenzen: PMID:26571212
• Als metabolischer Regulator beeinflusst NNMT den Energieverbrauch des weißen Fettgewebes, die hepatische Gluconeogenese und die Cholesterinbiosynthese, teilweise durch Beeinflussung des Polyaminflusses und der NAD+-Salvage-Wege.
• NNMT kann andere pyridinhaltige Verbindungen, die strukturell mit Nicotinamid verwandt sind, N-methylieren, was auf eine Rolle bei der Detoxifikation von Xenobiotika hindeutet.
  Verwandte Referenzen: PMID:30044909
• Überwiegend in der Leber exprimiert, mit niedrigeren Spiegeln in Niere, Lunge, Skelettmuskel, Plazenta und Herz; nicht im Gehirn oder in der Bauchspeicheldrüse nachgewiesen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Citrullinierung, und das Protein ist ein gut charakterisiertes Mitglied des Referenzproteoms mit direkter Sequenzierungsevidenz.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Protein, das die volle Länge des menschlichen NNMT (aa 1–264) umfasst. Dieses Design soll Antikörper generieren, die die native Proteinstruktur erkennen; jedoch wird eine empirische Validierung für jede Anwendung empfohlen.
• Für Western Blotting wird eine Bande um 30 kDa erwartet. Optimieren Sie die Antikörperverdünnung und Detektionsbedingungen mit geeigneten positiven Kontrollen (z. B. Leberlysat) und erwägen Sie eine subzelluläre Fraktionierung zur Anreicherung cytoplasmatischer Proteine.
• Bei der Immunfluoreszenz/ICC ist NNMT cytoplasmatisch. Verwenden Sie geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle, um cytoplasmatische Antigene zu erhalten, und validieren Sie mit bekannten negativen Geweben (z. B. Gehirn).
• Für ELISA-Anwendungen können direkte oder Sandwich-Formate getestet werden, mit sorgfältiger Titrierung des Beschichtungsantigens und des Antikörpers. Die Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-NNMT kann die Entwicklung von Multi-Species-Assays ermöglichen, aber die Sequenzhomologie sollte verifiziert werden.
• Es werden keine vorab validierten Verdünnungen oder Leistungsdaten bereitgestellt; jedes experimentelle System erfordert eine individuelle Optimierung.

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