Anti-NLRP3 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q96P20

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NLRP3-Funktion und Lokalisierung

• NLRP3 (NACHT-, LRR- und PYD-Domänen enthaltendes Protein 3), auch bekannt als Cryopyrin oder CIAS1, ist eine zentrale Sensor-Komponente des NLRP3-Inflammasoms, eines Multiproteinkomplexes, der für die angeborene Immunabwehr von zentraler Bedeutung ist.
• Nach Erkennung verschiedener Pathogen- und Schadens-assoziierter Signale – einschließlich extrazellulärem ATP, Nigericin, Kristallen von Natriumurat oder Amyloid-beta – initiiert NLRP3 den Inflammasom-Aufbau durch Rekrutierung von PYCARD/ASC und Pro-Caspase-1, was zur Caspase-1-Aktivierung, IL-1β/IL-18-Sekretion und pyroptotischem Zelltod führt. Verwandte Referenzen: PMID:16407889 PMID:18403674 PMID:18604214 PMID:27432880 PMID:23582325 PMID:28847925 PMID:31189953
• Die NLRP3-Aktivierung wird streng kontrolliert; sie erfordert K+-Efflux und beinhaltet Dynein-vermittelten Transport zum Mikrotubuli-Organisationszentrum (MTOC), wo es durch NEK7 freigeschaltet wird, bevor es über Phosphatidylinositol-4-phosphat-Bindung an dispergierte Trans-Golgi-Netzwerk (dTGN)-Membranen relokalisiert, um das aktive Inflammasom zu bilden. Verwandte Referenzen: PMID:36442502 PMID:39173637 PMID:30487600 PMID:34554188
• Über seine kanonische Inflammasom-Rolle hinaus fungiert NLRP3 auch unabhängig im Zellkern als Transkriptionsregulator, der die Th2-Zelldifferenzierung fördert, indem es an DNA bindet und die IL4-Expression antreibt.
• Das Protein lokalisiert dynamisch in mehrere subzelluläre Kompartimente, einschließlich Zytosol, Mitochondrien, Golgi-Apparat, endoplasmatisches Retikulum und Zellkern, und kann sezerniert werden.
• Vorwiegend in Makrophagen exprimiert, ist NLRP3 auch in dendritischen Zellen, B- und T-Zellen sowie in geschichtetem Plattenepithel und Hassall-Körperchen des Thymus vorhanden. Verwandte Referenzen: PMID:33231615 PMID:34133077 PMID:11786556 PMID:17164409
• Wichtige posttranslationale Modifikationen – einschließlich Phosphorylierung, ADP-Ribosylierung, Palmitoylierung, Disulfidbrückenbildung und Ubiquitinierung – feinabstimmen NLRP3-Stabilität, Lokalisierung und Aktivität.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blotting erwägen Sie die Verwendung eines SDS-PAGE-Gels mit niedrigem Prozentanteil (z.B. 8%) und optimieren Sie die Transferbedingungen für hochmolekulares NLRP3 (~118 kDa). Eine positive Kontrolle wie LPS-stimulierte THP-1-Makrophagen-Lysat kann vorteilhaft sein.
• Dieser Kaninchen monoklonale Antikörper ist für Standard-ELISA-Formate geeignet; bewerten Sie bei der Einrichtung Ihres Assays die Beschichtungskonzentrationen und kombinieren Sie ihn mit einem geeigneten Detektionsantikörper in Ihrer spezifischen Probenmatrix.
• Da die NLRP3-Expression unter entzündlichen Bedingungen induziert werden kann, kann die Vorbehandlung von Zellmodellen mit NLRP3-Aktivatoren (z.B. LPS plus Nigericin) die Detektion sowohl im WB als auch im ELISA verbessern.

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