Anti-NLRC4 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - Q9NPP4

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NLRC4-Funktion und -Lokalisierung

• NLRC4 (NLR-Familie CARD-Domäne enthaltendes Protein 4) ist ein Mitglied der NLR-Proteinfamilie, charakterisiert durch eine N-terminale CARD-Domäne, eine zentrale NACHT-Domäne und C-terminale Leucin-reiche Repeats (LRRs).
• Es fungiert als eine Schlüsselkomponente des Inflammasoms, die indirekt Proteine von pathogenen Bakterien und Pilzen erkennt, einen Inflammasom-Komplex assembliert, um die Caspase-1-Aktivierung, Zytokinproduktion und Makrophagen-Pyroptose zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:15107016
• Bei Aktivierung treibt das NLRC4-Inflammasom die Caspase-1-abhängige Reifung und Freisetzung der proinflammatorischen Zytokine IL-1β und IL-18 an.
• NLRC4 lokalisiert überwiegend im Zytoplasma und Zytosol und oligomerisiert nach Erkennung bakterieller Liganden zum Inflammasom-Komplex.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen: Isoform 1 ist stark in Lunge, Leukozyten, Lymphknoten und Kolon exprimiert; Isoform 2 ist ubiquitär exprimiert mit Anreicherung in Lunge und Milz; Isoform 4 ist hirnspezifisch.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, was mit seiner Regulation in der angeborenen Immunsignalübertragung übereinstimmt.
• Mutationen in NLRC4 sind mit autoinflammatorischen Syndromen wie dem familiären Kälte-Autoinflammationssyndrom 4 (FCAS4) und Autoinflammation mit infantiler Enterokolitis (AIFEC) verbunden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 85-170 des humanen NLRC4; überprüfen Sie die Sequenzhomologie bei Maus und Ratte, um die erwartete Kreuzreaktivität sicherzustellen.
• Für Western Blot wandert NLRC4 bei ~116 kDa; schließen Sie positive Kontrollen (z.B. LPS-stimulierte Makrophagenlysate) ein und optimieren Sie die Transferbedingungen für hochmolekulare Proteine.
• In der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie zeigt NLRC4 zytoplasmatische Färbung, aber die Inflammasom-Aktivierung induziert punktförmige Aggregate; erwägen Sie die Behandlung von Zellen mit bakteriellen Komponenten oder Flagellin, um diese Umlagerung zu visualisieren.
• Für ELISA titrieren Sie den Antikörper und das rekombinante Protein, um optimale Arbeitskonzentrationen zu ermitteln, und verwenden Sie, falls verfügbar, ein passendes Antikörperpaar.
• Dieser polyklonale Antikörper kann mehrere Isoformen detektieren; bestätigen Sie bei Bedarf die Identität der Banden durch Massenspektrometrie oder isoform-spezifische Sonden.

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