Anti-NINL polyklonaler Kaninchen-Antikörper für WB und ELISA - Q9Y2I6

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: NINL-Funktion und Lokalisation

• NINL (Ninein-like protein), auch als NLP bezeichnet, wird beim Menschen durch das Gen NINL (KIAA0980) kodiert und ist an der Mikrotubuli-Organisation sowie der Zentrosomenfunktion beteiligt.
• In Interphase-Zellen ist NINL an der Mikrotubuli-Organisation beteiligt; seine Überexpression führt zu Golgi-Fragmentierung, peripherer Lysosomendispersion und stört den Aufbau der mitotischen Spindel.
• Das Protein ist (nach Ähnlichkeit) auch am Vesikeltransport innerhalb von Photorezeptorzellen beteiligt und könnte zur ovariellen Karzinogenese beitragen.
• NINL lokalisiert primär am Zentrosom, einem wichtigen Mikrotubuli-Organisationszentrum, und ist im gesamten Zytoplasma verteilt.
• Die Expressionsmuster sind zellzyklusabhängig, wobei die Proteinspiegel während der G2/M-Phase ihren Höhepunkt erreichen. Sie werden in spezifischen Karzinom-Zelllinien (z. B. KYSE-150, HeLa, U2OS) sowie in fötalen und adulten Geweben beobachtet, darunter Herz, Skelettmuskulatur, Leber, Lunge, Cochlea, Gehirn, Hoden, Niere und Retina.
• Wichtige strukturelle und regulatorische Merkmale umfassen alternatives Spleißen, Kalzium- und Metallbindungsdomänen, Coiled-Coil-Motive sowie posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung und Ubiquitinierung, was seine vielfältigen zellulären Rollen widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 1–190) des menschlichen NINL, was darauf hindeutet, dass der Antikörper Epitope innerhalb dieser Domäne erkennen könnte; überprüfen Sie die Reaktivität mit bekannten NINL-Isoformen, die durch alternatives Spleißen entstehen.
• Validieren Sie für den Western Blot die Antikörperspezifität unter Verwendung von Zelllysaten aus Mensch und Maus angesichts der berichteten Kreuzreaktivität; eine Bande nahe dem vorhergesagten Molekulargewicht von etwa 156 kDa sollte erwartet werden.
• Verwenden Sie im ELISA rekombinantes NINL-Protein als Standard für die Beschichtungsoptimierung und zur Bestimmung der Antikörperaffinität; verwenden Sie geeignete Negativkontrollen, um die Spezifität zu bestätigen.
• Aufgrund der zellzyklusabhängigen Expression sollten Sie in Erwägung ziehen, Zellpopulationen zu synchronisieren oder Proben in der G2/M-Phase zu sammeln, falls eine verbesserte Detektion erforderlich ist.

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