Anti-Niemann Pick C1 monoklonaler Antikörper für WB - O15118

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Niemann Pick C1

• NPC1 ist ein 142 kDa mehrfach transmembranes Glykoprotein und das Produkt des NPC1-Gens (UniProt O15118).
• Es fungiert als intrazellulärer Cholesterintransporter, der zusammen mit NPC2 wirkt, um den Cholesterinabtransport aus späten Endosomen/Lysosomen zu vermitteln.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:10821832, PMID:12554680, PMID:18772377
• Nicht verestertes Cholesterin, das aus LDLs freigesetzt wird, wird von NPC2 in die N-terminale Cholesterinbindetasche von NPC1 übertragen, wobei die Hydroxylgruppe in der Tasche vergraben ist.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:18772377, PMID:19563754, PMID:27238017
• NPC1 verankert endosomale/lysosomale Kompartimente über eine Interaktion mit GRAMD1B an Kontaktstellen zum endoplasmatischen Retikulum und ermöglicht so den Cholesterintransfer zum ER.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:31537798
• Das Protein bindet Oxysterol mit höherer Affinität als Cholesterin und kann zum vesikulären Transport in Gliazellen beitragen und die Integrität der Nervenenden unterstützen.
• NPC1 hemmt die cholesterinvermittelte mTORC1-Aktivierung durch Interaktion mit SLC38A9.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:28336668
• Als endosomaler Eintrittsrezeptor für das Ebolavirus ist NPC1 an Wirt-Virus-Interaktionen beteiligt.
• Mutationen in NPC1 führen zur Niemann-Pick-Krankheit Typ C, einer lysosomalen Speicherkrankheit, die durch Cholesterinansammlung gekennzeichnet ist.
• Das Protein lokalisiert überwiegend an die begrenzende Membran später Endosomen und Lysosomen, was seiner Rolle bei der intrazellulären Cholesterinverteilung entspricht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen wurde aus der C-terminalen Region (Aminosäuren 1179‑1278) des humanen NPC1 entworfen; diese Region kann eine begrenzte konservierung über Artengrenzen hinweg aufweisen – validieren Sie dies in der vorgesehenen Spezies mit geeigneten Kontrollen.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 142 kDa; verwenden Sie ein Polyacrylamidgel mit niedrigem Prozentsatz und stellen Sie einen effizienten Proteintransfer sicher, da große Transmembranproteine erweiterte Transferzeiten erfordern können.
• Für IHC‑P und IF/ICC testen Sie verschiedene Antigen-Retrieval-Protokolle und Fixierungsmittel, um den Nachweis zu optimieren; fügen Sie Isotypkontrollen hinzu, um die Signalspezifität zu bestätigen.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus- und Ratten-NPC1, überprüfen Sie die Kreuzreaktivität jedoch immer unter Verwendung positiver und negativer Lysate oder Gewebeschnitte Ihrer Zielspezies.
• Bei Verwendung in ELISA titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Arbeitskonzentration für Ihre Antigenbeschichtungsbedingungen zu ermitteln.

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