Anti-NG2/CSPG4-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA – Q6UVK1

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von NG2/CSPG4

• NG2/CSPG4 ist ein Chondroitinsulfat-Proteoglykan, auch als Melanom-Chondroitinsulfat-Proteoglykan (MCSP) bezeichnet, das vom CSPG4-Gen kodiert wird. Es handelt sich um ein großes Transmembranprotein mit einer extrazellulären Domäne, die Chondroitinsulfat-Glykosaminoglykan-Ketten trägt.
• Es fungiert als Zelloberflächenrezeptor für Kollagen alpha 2(VI) und verschiedene Wachstumsfaktoren und reguliert die Zellproliferation, Migration und mikrovaskuläre Morphogenese. Außerdem hemmt es während der Axonregeneration das Neuritenwachstum und den Kollaps des Wachstumskegels.
• Es spielt eine entscheidende Rolle bei der Invasion von Melanomzellen, indem es den MPP16-abhängigen Abbau von Kollagen Typ I reguliert und die Plasminogenaktivierung verstärkt, während es Angiostatin hemmt, wodurch der Gewebeumbau und die Angiogenese gefördert werden.
• Es wirkt über seinen zytoplasmatischen C-Terminus als Signaltransduktor und interagiert mit Gerüst- und Signalisierungsproteinen, um über die Rho-GTPase-, CDC42-, ACK1- und BCAR1-Signalwege die Bildung von Retraktionsfasern, die Zellpolarisierung und die Integrin-vermittelte Adhäsion zu fördern.
• Es aktiviert die FAK- und ERK1/ERK2-Signalkaskaden und trägt dadurch zur Zellspreizung und Migration bei.
• Es befindet sich hauptsächlich in der Zellmembran, einschließlich der apikalen Zellmembran, der Membran des Lamellipodiums und der Zelloberflächenfortsätze.
• Auf Proteinebene wurde es in Fibroblasten, der Plazenta und malignen Melanomzellen nachgewiesen, was seine Bedeutung für die Krebsprogression und Entwicklungsprozesse unterstreicht.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Phosphorylierung, Disulfidbrückenbildung und N-Glykosylierung. Das Protein verfügt über eine Transmembranhelix und ein Signalpeptid und wird daher als Transmembran-Proteoglykan vom Typ I klassifiziert.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen (AS 1950–2210) liegt in der zytoplasmatischen Domäne; daher kann der Antikörper im Western Blot sowohl vollständige als auch verkürzte Formen von CSPG4 nachweisen.
• Aufgrund des hohen Molekulargewichts (~251 kDa) sollte ein SDS-PAGE-Gel mit niedrigem Acrylamidanteil (z. B. 6 %) und eine verlängerte Transferzeit für optimale WB-Ergebnisse in Betracht gezogen werden.
• Für IHC-P kann eine hitzeinduzierte Antigen-Retrieval-Methode erforderlich sein, um das Epitop in formalinfixiertem, paraffineingebettetem Gewebe freizulegen.
• Bei IF/ICC sind Permeabilisierungsschritte unerlässlich, damit der Antikörper das intrazelluläre Epitop erreichen kann.
• Die bestätigte Kreuzreaktivität mit Maus ermöglicht vergleichende Untersuchungen. Aufgrund möglicher speziesabhängiger Unterschiede wird jedoch eine Validierung im jeweiligen Probensystem empfohlen.
• Beim Design von ELISA-Assays kann die Kombination dieses Antikörpers mit einem Fangantikörper, der gegen ein extrazelluläres Epitop gerichtet ist, effektive Sandwich-Immunoassays ermöglichen.

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