Anti-NG2/CSPG4 Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB, ELISA - Q6UVK1

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NG2/CSPG4 Funktion und Lokalisierung

• Chondroitinsulfat-Proteoglykan 4 (NG2/CSPG4), auch bekannt als Melanom-Chondroitinsulfat-Proteoglykan, ist ein großes integrales Membranproteoglykan, das an Zellproliferation, -migration und mikrovaskulärer Morphogenese beteiligt ist.
• Es fungiert als Zelloberflächenrezeptor für Kollagen alpha 2(VI) und erleichtert die Zellmigration auf kollagenreichen Substraten. NG2/CSPG4 bindet Wachstumsfaktoren und Proteasen der extrazellulären Matrix, moduliert deren Aktivität und trägt zur Invasion von Melanomzellen durch MPP16-abhängigen Typ-I-Kollagenabbau bei.
• Subzellulär lokalisiert sich NG2/CSPG4 in der Zellmembran, apikalen Membran, Lamellipodiummembran und Zelloberfläche, was mit seiner Rolle bei Zellpolarität, Adhäsion und Migration übereinstimmt.
• Die Gewebeexpression ist in malignen Melanomzellen prominent und auf Proteinebene auch in Fibroblasten und der Plazenta nachweisbar. Verwandte Referenzen: PMID:36213313 PMID:32337544
• Als Signaltransduktor rekrutiert die zytoplasmatische Domäne Gerüst- und Signalproteine, fördert die Bildung von Retraktionsfasern, die Zellpolarisation über Rho-GTPase und die Integrin-vermittelte Adhäsion durch CDC42-, ACK1- und BCAR1-Kaskaden. Es aktiviert auch die FAK- und ERK1/ERK2-Wege.
• Wichtige strukturelle Merkmale umfassen Disulfidbrücken, eine Transmembrandomäne und mehrere Glykosylierungs-/Phosphorylierungsstellen, was es als Glykoprotein und Phosphoprotein klassifiziert, das an Angiogenese, Entwicklungsprozessen und Geweberemodellierung beteiligt ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 1340–1563 nahe der C-terminalen extrazellulären Region; daher wird erwartet, dass der Antikörper das全长 ~251 kDa NG2/CSPG4-Protein im Western Blot erkennt. Validieren Sie den Nachweis in menschlichen Melanomzelllinien (z. B. A375) oder CSPG4-transfizierten Zellen.
• Für ELISA sollten Sie die Verwendung von rekombinanten CSPG4-extrazellulären Domänenfragmenten oder ganzen Zelllysaten aus CSPG4-exprimierenden Zellen in Betracht ziehen. Optimieren Sie die Beschichtungs- und Detektionsbedingungen basierend auf dem spezifischen Assay-Format.
• Angesichts des hohen Molekulargewichts sollten Sie ein 6–8% SDS-PAGE-Gel und eine verlängerte Transferzeit für den Western Blot verwenden, um einen effizienten Transfer des großen Proteoglykans zu gewährleisten.

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