Anti-NFYB Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P25208

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NFYB-Funktion und Lokalisierung

• NFYB kodiert für die Beta-Untereinheit des nukleären Transkriptionsfaktors Y (NF-Y), einen heterotrimeren Komplex, der die Untereinheiten NF-YA und NF-YC umfasst. Dieser Komplex bindet spezifisch an das CCAAT-Box-Motiv (5'-CCAAT-3') in eukaryotischen Promotoren.
• NF-Y kann je nach seinen interagierenden Kofaktoren als transkriptioneller Aktivator oder Repressor wirken, was ihm ermöglicht, die Genexpression als Reaktion auf verschiedene Signalwege fein abzustimmen.
• Konsistent mit seiner Rolle als Transkriptionsfaktor ist NFYB ausschließlich im Zellkern lokalisiert, wo es an DNA-Bindung und transkriptioneller Regulation beteiligt ist.
• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Ubiquitinierung und Isopeptidbindungsbildung, die seine Stabilität, Interaktionen oder Aktivität modulieren können.
• NFYB ist auch unter den Aliasnamen HAP3, CBF-A, CBF-B und NF-YB bekannt, was seine historische Identifizierung in verschiedenen experimentellen Kontexten widerspiegelt.
• Mit einem berechneten Molekulargewicht von etwa 22,8 kDa umfasst das humane NFYB-Vollprotein 207 Aminosäuren, wie sie durch das zur Erzeugung dieses Antikörpers verwendete Immunogen abgedeckt werden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot sollten die Ausgangsverdünnungen des Antikörpers empirisch optimiert werden; typische Kaninchen-polyklonale Antikörper können im Bereich von 1:500–1:2000 funktionieren, aber eine Validierung im relevanten Gewebe- oder Zelllysat ist unerlässlich.
• Es wird berichtet, dass der Antikörper humanes und murines NFYB detektiert. Bei der Arbeit mit anderen Spezies sollten Sie eine Sequenzalignment durchführen und die Kreuzreaktivität experimentell testen.
• In ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz eingesetzt werden; für die Signalerzeugung ist die Paarung mit einem geeigneten sekundären Antikörper erforderlich.
• Da NFYB ein nukleäres Protein ist, wird die Verwendung von Nuklearextraktionsprotokollen empfohlen, um das Zielprotein anzureichern und den Hintergrund durch zytoplasmatische Proteine zu minimieren.
• Da das Immunogen das nahezu vollständige Protein (aa 1–207) abdeckt, erkennt der polyklonale Antikörper wahrscheinlich mehrere Epitope. Seien Sie sich jedoch möglicher isoform-spezifischer Reaktivität bewusst, falls Spleißvarianten existieren.

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