Anti-NFIL3-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q16649

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von NFIL3

• NFIL3 (Nuclear factor interleukin-3-regulated protein), auch bekannt als E4BP4, IL3BP1, NFIL3A oder NF-IL3A, ist ein durch das NFIL3-Gen beim Menschen kodierter Transkriptionsregulator (GeneID: 4783). Es erkennt die Sequenz 5'-[GA]TTA[CT]GTAA[CT]-3', die in vielen zellulären und viralen Promotoren vorkommt, und bindet daran.
• Wirkt sowohl als Transkriptionsrepressor als auch als Transkriptionsaktivator. Es reprimiert die Transkription von Promotoren mit ATF-Stellen und konkurriert mit PAR-DNA-bindenden Faktoren (DBP, HLF, TEF) um dieselbe Konsensusstelle. In T-Zellen aktiviert es die Transkription vom Interleukin-3-Promotor.
• NFIL3 ist eine zentrale Komponente der zirkadianen Uhr und fungiert als negativer Regulator der PER2-Expression, wodurch es die zirkadiane Oszillation beeinflusst.
• Es ist subzellulär im Zellkern lokalisiert, was mit seiner Funktion als Transkriptionsfaktor übereinstimmt. Es wird in verschiedenen Geweben exprimiert, darunter Blase, Magen, Schilddrüse, Rückenmark, Lymphknoten, Luftröhre, Nebenniere, Knochenmark und Muskel.
• Wird posttranslational durch Phosphorylierung und Ubiquitinierung (Isopeptidbindung, Ubl-Konjugation) modifiziert, was seine Aktivität und Stabilität regulieren kann.
• Spielt eine Rolle bei der Entwicklung von Immunzellen; es schützt Pro-B-Zellen vor Apoptose und ist für die Entwicklung von Vorläuferzellen natürlicher Killerzellen erforderlich.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 133-462 des humanen NFIL3 und deckt damit einen großen Teil des Proteins ab. Diese Region umfasst die DNA-Bindungsdomäne und wahrscheinlich wichtige funktionelle Motive, wodurch sich der Antikörper für den Nachweis von vollständigem NFIL3 eignet.
• Für Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 51 kDa. Verwenden Sie geeignete Positivkontrollen, beispielsweise Lysate aus Geweben mit hoher NFIL3-Expression wie Lymphknoten oder Knochenmark, und überprüfen Sie die Bandspezifität nach Möglichkeit anhand von Knockdown- oder Knockout-Proben.
• Für Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) ist eine geeignete Fixierung und Permeabilisierung sicherzustellen, damit das nukleäre NFIL3 zugänglich ist. Verwenden Sie eine nukleäre Gegenfärbung, um die Lokalisierung zu bestätigen.
• Für ELISA sollte ein Sekundärantikörper verwendet werden, der für den Nachweis polyklonaler Kaninchenantikörper optimiert ist. Validieren Sie die Assay-Bedingungen anhand von rekombinantem NFIL3-Protein oder Zelllysaten.
• Da der Antikörper mit NFIL3 der Ratte kreuzreagiert, kann er für Speziesvergleichsstudien eingesetzt werden. Bestätigen Sie jedoch stets die Reaktivität in Ihrem spezifischen Versuchsaufbau.

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