Anti-NFE2L1-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14494

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von NFE2L1

• NFE2L1 (NRF1/TCF11/LCR-F1) ist ein Transkriptionsfaktor vom CNC-Typ mit bZIP-Domäne, der als Sensor in der Membran des endoplasmatischen Retikulums fungiert. Bei Belastungen wie Cholesterinüberschuss, oxidativem Stress oder Proteasomhemmung wird er durch DDI2 gespalten und in den Zellkern transloziert. Zugehörige Referenzen: PMID:20932482, PMID:24448410
• Im Zellkern bildet NFE2L1 Heterodimere mit kleinen Maf-Proteinen (MAFF, MAFG, MAFK) und bindet an Elemente der Antioxidationsantwort (AREs), wodurch Gene reguliert werden, die für den Schutz vor oxidativem Stress und die Entgiftung von entscheidender Bedeutung sind. Zugehörige Referenzen: PMID:8932385, PMID:9421508
• Es fungiert als wichtiger Sensor für Cholesterinüberschuss: An der ER-Membran bindet es über sein CRAC-Motiv direkt an Cholesterin, wodurch seine Spaltung und Aktivierung blockiert werden und die Expression von Genen zum Cholesterinabbau, wie beispielsweise CD36, ermöglicht wird.
• NFE2L1 ist für die Proteasom-Homöostase unerlässlich. Bei einer Proteasomhemmung aktiviert es ein Transkriptionsprogramm, das die Expression von Genen für Proteasomuntereinheiten hochreguliert, um die Proteasomfunktion wiederherzustellen. Zugehörige Referenz: PMID:20932482
• Während der fetalen Leberhämatopoese spielt NFE2L1 eine schützende Rolle gegen oxidative Schäden und trägt zur Aufrechterhaltung der hepatischen Lipidhomöostase bei.
• Zusammen mit CEBPB unterdrückt NFE2L1 während der Differenzierung von Odontoblasten die DSPP-Expression und aktiviert in Osteoblasten als Reaktion auf Ascorbinsäure SP7/Osterix. Zugehörige Referenz: PMID:15308669
• Auf subzellulärer Ebene ist NFE2L1 über eine Transmembranhelix mit Signalanker an der Membran des endoplasmatischen Retikulums verankert. Bei Stresssignalen wird es proteolytisch freigesetzt und transloziert in den Zellkern, wo es seine Transkriptionsfunktionen ausübt.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Glykosylierung, Phosphorylierung und Ubiquitin-ähnliche Konjugation, die seine Stabilität und Aktivität regulieren können.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen (Aminosäuren 515–772) entspricht einer Region in der C-terminalen Hälfte des humanen NFE2L1. Diese Region umfasst Domänen, die möglicherweise an der DNA-Bindung und Dimerisierung beteiligt sind. Bei Verwendung in WB wird für das Volllängenprotein eine Bande bei etwa 85 kDa erwartet; kürzere Isoformen oder Spaltprodukte können ebenfalls beobachtet werden.
• Für IHC-P sollten Protokolle zur Antigenrückgewinnung in Betracht gezogen werden, beispielsweise eine hitzeinduzierte Epitopdemaskierung in Citratpuffer bei pH 6,0. Die Antikörperkonzentration sollte abhängig vom Gewebetyp und der Fixierung optimiert werden.
• Bei IF/ICC ist eine geeignete Permeabilisierung sicherzustellen, um sowohl nukleäres als auch im ER lokalisiertes Protein nachzuweisen. Eine Ko-Färbung mit Organellmarkern kann die Interpretation unterstützen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Fang- oder Nachweisreagenz verwendet werden; eine Validierung des Antikörperpaars wird jedoch empfohlen.
• Eine Kreuzreaktivität mit murinem und Ratten-NFE2L1 wurde berichtet. Die Leistung sollte jedoch in Ihrem spezifischen Modellsystem bestätigt werden.

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