Anti-NF-κB2 monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q00653

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von NF-κB2

• NF-κB2 kodiert für die p100-Vorläufer und ihre proteolytisch prozessierte p52-Untereinheit, die beide als Komponenten des NF-κB-Transkriptionsfaktorkomplexes fungieren.
• Das p52-RELB-Heterodimer wirkt als transkriptioneller Aktivator, während das p52-p52-Homodimer als Repressor fungiert – dies zeigt die dimerspezifische Regulation von NF-κB-Zielgenen.
• NF-κB ist ein pleiotroper Transkriptionsfaktor, der auf diverse Stimuli reagiert und Gene kontrolliert, die an Entzündung, Immunität, Zellwachstum, Differenzierung und Apoptose beteiligt sind.
• Volllängen-p100 hält assoziierte NF-κB-Proteine über seine Ankyrin-Wiederholungsdomäne im Zytoplasma zurück; nach Aktivierung des nicht-kanonischen Signalwegs entsteht durch proteasomvermittelte Prozessierung p52, das in den Zellkern transloziert.
• Eine alternative Isoform (p49) kann den HIV-Enhancer in Synergie mit p65 (RELA) stimulieren.
• NF-κB2 reguliert zusammen mit RELB die zirkadiane Uhr, indem es die transkriptionelle Aktivität des CLOCK-BMAL1-Heterodimers unterdrückt.
• Posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung, Ubiquitinierung und Prozessierung sind entscheidend für die Aktivität von NF-κB2, was sich in Schlüsselwörtern wie „Phosphoprotein“ und „Isopeptidbindung“ widerspiegelt.
• Das Protein enthält Ankyrin-Wiederholungen und eine DNA-bindende Rel-Homologiedomäne, die seine doppelte Rolle bei zytoplasmatischer Retention und transkriptioneller Regulation ermöglichen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen kartiert auf eine C-terminale Region (Aminosäuren 800–900) innerhalb der p100-spezifischen Ankyrin-Wiederholungsdomäne; dieser Antikörper sollte Volllängen-p100 (~97 kDa) erkennen, aber nicht die prozessierte p52-Untereinheit.
• Erwägen Sie für den Western Blot die Analyse von Ganzzelllysaten aus Populationen, die mit NF-κB-Signalwegaktivatoren (z. B. TNF-α, LIGHT) stimuliert wurden, um die p100-Signale zu verstärken.
• Es wurde eine Kreuzreaktivität mit Maus- und Rattenproben berichtet; validieren Sie den Antikörper in der relevanten Spezies- und Gewebekontext durch Einbeziehung geeigneter Positiv- und Negativkontrollen.
• Optimieren Sie bei ELISA-Anwendungen die Beschichtungsantigen- und Antikörpertitration unter Ihren Versuchsbedingungen, um die gewünschte Empfindlichkeit und Spezifität zu erreichen.

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