Anti-NF-kB p65/RelA monoklonaler Antikörper (KO validiert) für WB, IF/ICC, IP, ELISA, ChIP - Q04206

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von NF-kB p65/RelA

• NF-kB p65/RelA ist eine Untereinheit des NF-kB-Transkriptionsfaktorkomplexes, der als Homo- oder Heterodimere vorliegt; das Heterodimer mit NFKB1 ist die häufigste Form und wirkt als transkriptioneller Aktivator.
• Es spielt eine zentrale Rolle bei Entzündung, Immunität, Differenzierung, Zellwachstum, Tumorgenese und Apoptose durch die Regulation der Expression von Zielgenen.
• Die Aktivierung von NF-kB umfasst die Phosphorylierung und den Abbau von I-kB-Inhibitoren, was zur Freisetzung und nukleären Translokation des aktiven p65/RelA-Komplexes führt.
• Essenziell für die Expression von Zytokingenen in T-Zellen. Verwandte Referenzen: PMID:15790681
• Schlüsseltranskriptionsfaktor, der die Interferonantwort bei einer SARS-CoV-2-Infektion reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:33440148
• Assoziiert über die Interaktion mit DDX1 mit Chromatin an NF-kB-Promotorregionen und moduliert die Promotorzugänglichkeit.
• Unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, darunter Acetylierung, Phosphorylierung, Methylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität feinabstimmen.
• In ruhenden Zellen überwiegend zytoplasmatisch, transloziert nach Aktivierung in den Zellkern; auch unter basalen Bedingungen im Zellkern nachweisbar.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem synthetischen Peptid aus der C-terminalen Region (AS 450-551) von humanem NF-kB p65. Bei Anwendungen wie WB ist eine Bande um 58-60 kDa zu erwarten; verwenden Sie geeignete Ladekontrollen und validieren Sie das Signal in KO-Zelllinien.
• Dieser Antikörper ist für mehrere Anwendungen geeignet; bei IF/ICC können je nach Aktivierungszustand von NF-kB sowohl nukleäre als auch zytoplasmatische Signale beobachtet werden. Fügen Sie unbehandelte und stimulierte Proben zum Vergleich hinzu.
• Optimieren Sie bei ChIP-Assays die Quervernetzungs- und Sonikationsbedingungen für Ihren Zelltyp. Die Leistung des Antikörpers sollte anhand positiver und negativer Zielgenregionen validiert werden.
• Kreuzreaktivität mit Maus, Ratte und Affe ist nachgewiesen; überprüfen Sie immer die Spezifität für Ihre Art und Ihr Gewebe von Interesse, bevor Sie Experimente hochskalieren.
• Wenn Sie diesen KO-validierten Antikörper verwenden, sollten Sie eine Negativkontrolle (z. B. siRNA-Knockdown oder CRISPR-KO-Lysat) hinzufügen, um die Bandenspezifität bei WB zu bestätigen.

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