Anti-Neutrophilen-Elastase (ELANE) monoklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - P08246

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Neutrophilen-Elastase (ELANE)

• Neutrophilen-Elastase (ELANE), auch bekannt als Knochenmark-Serinprotease, Elastase-2, humane Leukozyten-Elastase (HLE), Medullasin und PMN-Elastase, ist eine Serinprotease, die vom ELANE-Gen kodiert wird.

• Modifiziert die Funktionen von natürlichen Killerzellen, Monozyten und Granulozyten. Verwandte Referenzen: PMID:15140022

• Weist mikrobizide Aktivität durch Spaltung bakterieller Proteine auf; verdaut das Außenmembranprotein A (ompA) bei E. coli und K. pneumoniae und trägt so zur Abtötung dieser Bakterien in vitro bei. Verwandte Referenzen: PMID:10947984, PMID:25161283

• Entscheidend für die Bildung von neutrophilen extrazellulären Fallen (NETs) durch Translokation zum Zellkern, Abbau von Histon H4 und Erleichterung der Chromatin-Dekondensation. NETs fangen Pathogene während Entzündungen ab. Verwandte Referenzen: PMID:20974816, PMID:25066128, PMID:28574339

• Hemmt die C5a-abhängige Freisetzung von Neutrophilenenzymen und die Chemotaxis. Verwandte Referenzen: PMID:15140022

• Fördert die Blutgerinnung und Plättchenaggregation durch Spaltung des Gewebsfaktor-Weg-Inhibitors (TFPI) und Aktivierung des Integrins alpha-IIb/beta-3. Verwandte Referenzen: PMID:20676107, PMID:25211214, PMID:9111081

• Spaltet GSDMB und hemmt die Pyroptose. Verwandte Referenzen: PMID:36899106

• Subzellulär lokalisiert in zytoplasmatischen Vesikeln, Phagosomen, Lysosomen, zytolytischen Granula und dem Zellkern. Gewebespezifische Expression in Knochenmarkszellen und Neutrophilen. Verwandte Referenzen: PMID:10947984

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus der katalytischen Domäne (aa 167-267), was darauf hindeutet, dass der Antikörper wahrscheinlich die reife aktive Form von ELANE erkennt. Validieren Sie die Spezifität mit rekombinantem Protein oder Zelllysaten, die aktives ELANE exprimieren.
• Für Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~29 kDa; beachten Sie, dass das unverarbeitete Zymogen bei einem höheren Molekulargewicht erscheinen kann. Bestätigen Sie die Bandenidentität mit geeigneten Kontrollen.
• Bei Immunpräzipitation (IP)-Experimenten berücksichtigen Sie die mögliche Präferenz des Antikörpers für die aktive Enzymform, was für die Untersuchung von Proteasewechselwirkungen und -komplexen relevant ist.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden. Erwägen Sie die Paarung mit einem anderen ELANE-spezifischen Antikörper für die Entwicklung eines Sandwich-ELISA.
• Aufgrund der proteolytischen Aktivität von ELANE vermeiden Sie langwierige Inkubationen bei 37°C ohne Proteaseinhibitoren, um Autodegradation und einen möglichen Signalverlust zu verhindern.
• Kreuzreaktivität wird nur für den Menschen berichtet; testen Sie die Reaktivität bei anderen Spezies, falls dies für Ihr experimentelles Modell erforderlich ist.

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