Anti-Neuropilin-1 (NRP1) Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - O14786

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Neuropilin-1

• Neuropilin-1 (NRP1) ist ein multifunktionaler Zelloberflächenrezeptor, der auch als Vascular endothelial cell growth factor 165 Rezeptor, CD304 und BDCA4 bekannt ist. alternatives Spleißen erzeugt Isoformen mit nicht überlappenden Expressionsmustern, was zu seinen vielfältigen gewebespezifischen Funktionen beiträgt.
• Es bindet Semaphorine der Klasse 3 (z. B. SEMA3A) und Mitglieder der VEGF-Familie (VEGF165, PLGF-2, VEGFB) und vermittelt dadurch Chemorepulsion bzw. Angiogenese. Verwandte Referenzen: PMID:10688880, PMID:9288753, PMID:9529250
• NRP1 erkennt ein C-End-Rule (CendR)-Motiv (R/KXXR/K) an Liganden, was die zelluläre Internalisierung und vaskuläre Leckage auslöst. Verwandte Referenzen: PMID:19805273
• Koexpression mit VEGFR2/KDR verstärkt die VEGF165-Bindung und nachgeschaltete Signalwege und fördert die Chemotaxis von Endothelzellen sowie die Angiogenese.
• Im sich entwickelnden Nervensystem steuert NRP1 die Axonprojektion von Motoneuronen und die Migration von Zellkörpern, einschließlich der Migration von fazialen Motoneuronen von der Rhombomer 4 zur 6.
• NRP1 lokalisiert sich an der Zellmembran und im Zytoplasma, kommt zudem sezerniert vor und ist mit der mitochondrialen Membran assoziiert – was seine multifunktionalen Rollen widerspiegelt.
• In erwachsenen Geweben ist NRP1 hoch exprimiert in Herz und Plazenta, mäßig in Lunge, Leber, Skelettmuskel, Niere und Bauchspeicheldrüse und gering im Gehirn. Verwandte Referenzen: PMID:10688880, PMID:9529250

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 824–923 innerhalb der C-terminalen Domäne von humanem NRP1. Diese Region ist bei Maus und Ratte konserviert, was mit der beschriebenen Kreuzreaktivität übereinstimmt. Überprüfen Sie die Sequenzübereinstimmung bei Ihrer interessierenden Spezies vor den Experimenten.
• Für die Western-Blot(WB)-Analyse ist eine Bande nahe 103 kDa für volllanges NRP1 zu erwarten. Verwenden Sie Protokolle zur Membranproteinextraktion und reduzierende Bedingungen, da NRP1 durch Disulfidbindungen verknüpfte Dimere bildet und höhere Ordnungsstrukturen aufweisen kann. Validieren Sie die Spezifität mit geeigneten Kontrollen (z. B. Peptidkompetition oder Knockdown).
• Für ELISA kann dieser Antikörper als Capture- oder Nachweisreagenz geeignet sein; titrieren Sie die Bedingungen mit rekombinantem NRP1 oder bekannten positiven Proben und fügen Sie negative Kontrollen hinzu, um die Assayempfindlichkeit und den dynamischen Bereich zu bestimmen.
• Zusätzliche Banden können aufgrund von Isoformheterogenität, Glykosylierung oder Proteoglykan-Modifikationen auftreten; bestätigen Sie die Identität der Bande bei Bedarf mittels Massenspektrometrie oder isoformspezifischen Reagenzien.
• Lagern Sie nach Erhalt bei -20°C oder kälter und vermeiden Sie wiederholte Gefrier-Auftau-Zyklen, um die Leistungsfähigkeit zu erhalten.

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