Anti-Neurofilament L monoklonaler Antikörper für WB, IF, IHC, ELISA - P07196

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des Neurofilament-Light-Polypeptids

• Das Neurofilament-Light-Polypeptid (NEFL) ist ein Mitglied der Familie der Intermediärfilamente und eines der drei Haupt-Neurofilamentproteine, zu denen auch NEFM und NEFH gehören, die gemeinsam das neuronale Kaliber und die axonale Struktur aufrechterhalten.
• NEFL arbeitet mit anderen neuronalen Intermediärfilamentproteinen wie Peripherin (PRPH) und Alpha-Internexin (INA) zusammen, um die fädigen Netzwerke zu bilden, die für die neuronale Integrität unerlässlich sind.
• Das Protein wird vorwiegend in Axonen exprimiert, lokalisiert sich im Zytoplasma und Zytoskelett der neuronalen Zellen und spielt eine kritische Rolle beim radialen Wachstum der Axone.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Glykierung, Methylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, die die Filamentassemblierung, Stabilität und Wechselwirkungen mit anderen zytoskelettalen Komponenten regulieren.
• Mutationen im NEFL-Gen sind mit neurodegenerativen Störungen verbunden, einschließlich Charcot-Marie-Tooth-Krankheit Typ 1F und 2E, was seine Rolle bei der axonalen Erhaltung und der Anfälligkeit für Neuropathien unterstreicht.
• Das Protein hat ein Molekulargewicht von ca. 61,5 kDa (berechnet aus der Sequenz) und wird im SDS-PAGE aufgrund posttranslationaler Modifikationen oft als 68 kDa-Band nachgewiesen.
• NEFL dient zusammen mit anderen Neurofilament-Untereinheiten als Biomarker für neuronale Schäden bei Zuständen wie Multipler Sklerose, Alzheimer-Krankheit und traumatischer Hirnverletzung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da das Immunogen den Aminosäuren 60-250 entspricht, einer zentralen Region des menschlichen NEFL-Proteins, erkennt der Antikörper wahrscheinlich ein konserviertes Epitop; berücksichtigen Sie bei der Verwendung für nicht-menschliche Spezies einen Sequenzabgleich, um die Reaktivität zu bestätigen.
• Für Western Blot kann eine Bande in der Nähe von 68 kDa beobachtet werden; validieren Sie durch Vergleich mit dem erwarteten Molekulargewicht und Verwendung geeigneter Ladungskontrollen wie β-Actin oder GAPDH.
• In der Immunfluoreszenz sollten optimale Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen getestet werden; Paraformaldehyd-Fixierung gefolgt von Triton X-100-Permeabilisierung wird häufig für Neurofilament-Färbungen verwendet.
• Für die Immunhistochemie können Antigen-Retrieval-Methoden (z. B. wärmevermitteltes Citratpuffer) den Nachweis verbessern; fügen Sie positive und negative Gewebekontrollen ein.
• Bei Verwendung des Antikörpers in ELISA stellen Sie sicher, dass das Beschichtungsantigen mit der Immunogenregion übereinstimmt, um Kreuzreaktionen mit anderen Neurofilament-Untereinheiten zu vermeiden.

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