Anti-Neurofilament H monoklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - P12036

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Neurofilament H (NFH) Funktion und Lokalisierung

• Neurofilament H (NFH), auch bekannt als 200 kDa Neurofilament-Protein oder Neurofilament-Triplett-H-Protein, ist eine schwere Polypeptidkomponente neuronaler Intermediärfilamente.
• NFH ist essentiell für die Aufrechterhaltung des neuronalen Kalibers und spielt eine kritische Rolle in reifen Axonen, die nicht durch die kleineren Neurofilamentproteine NEFL und NEFM kompensiert wird.
• Es kann mit anderen neuronalen Intermediärfilamentproteinen wie Peripherin (PRPH) und Internexin (INA) zusammenarbeiten, um filamentöse Netzwerke in Neuronen zu bilden (By similarity).
• Das Protein lokalisiert im Zytoplasma, insbesondere innerhalb des Zytoskeletts von Axonen, wo es zur strukturellen Integrität und zum axonalen Transport beiträgt.
• NFH unterliegt einer umfangreichen posttranslationalen Phosphorylierung, von der angenommen wird, dass sie die Filamentassemblierung und Interaktionen mit anderen zytoskelettalen Elementen reguliert.
• Alternatives Spleißen des NEFH-Gens produziert mehrere Isoformen, die möglicherweise seine Funktion modulieren.
• Genetische Varianten in NEFH sind mit neurodegenerativen Erkrankungen assoziiert, einschließlich Amyotropher Lateralsklerose (ALS) und Charcot-Marie-Tooth-Krankheit Typ 2CC (CMT2CC), was seine klinische Relevanz unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 550–650 des humanen Neurofilament H entspricht, einer Region, die über Spezies hinweg konserviert sein könnte (basierend auf Kreuzreaktivitätsdaten), was auf eine robuste antigene Epitope hindeutet.
• Für Western Blot (WB) ist ein Band bei etwa 112 kDa zu erwarten; die Optimierung der Probenvorbereitung und Nachweisbedingungen wird unter Verwendung geeigneter neuronaler Zell- oder Gewebelysate empfohlen.
• Bei Immunpräzipitations-(IP)-Anwendungen können Vorreinigung und Antikörpertitration die Spezifität verbessern; ein nachfolgender WB-Nachweis kann das Ziel bestätigen.
• ELISA kann für den quantitativen Nachweis eingesetzt werden; verwenden Sie gereinigtes Protein oder Peptid als Kontrolle und validieren Sie es in der relevanten biologischen Matrix.
• Aufgrund des Potenzials für posttranslationale Modifikationen (z.B. Phosphorylierung) sollten Phosphatase-Inhibitoren während der Probenvorbereitung verwendet werden, um den endogenen Zustand zu erhalten.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-Neurofilament H ist angegeben, was die Verwendung in Nagetiermodellen ermöglicht; dennoch wird eine Sequenzabgleichung der Epitopregion in den Zielarten empfohlen.

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