Monoklonaler Anti-Nesprin3 (KASH3)-Antikörper für WB, ELISA - Q6ZMZ3

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Nesprin-3

• Nesprin-3, auch bekannt als KASH-Domäne-enthaltendes Protein 3 (KASH3) oder Kernhüllen-Spektrin-Wiederholungsprotein 3, wird vom SYNE3-Gen (C14orf139, C14orf49, LINC00341) kodiert und ist ein Bestandteil des LINC (LInker of Nucleoskeleton and Cytoskeleton)-Komplexes.
• Es fungiert als Ankerprotein, das den Kern an das Zytoskelett bindet, indem es an Plectin (PLEC) bindet, das mit dem Intermediärfilamentsystem interagiert, und dadurch die Verbindung zwischen der Kernlamina und dem Zytoskelett vermittelt.
• Der LINC-Komplex ist für die Übertragung mechanischer Kräfte durch die Kernhülle essenziell, und Nesprin-3 spielt eine Rolle bei der Kernbewegung und -positionierung.
• In Aortenendothelzellen ist Nesprin-3 für die strömungsinduzierte Zentrosomenpolarisation und gerichtete Migration erforderlich und trägt zur Regulation der Zellmorphologie bei.
• Nesprin-3 lokalisiert an der äußeren Kernmembran, der Kernhülle und dem rauhen Endoplasmatischen Retikulum.
• Es wird auf Proteinebene in Aortenendothelzellen exprimiert.
• Das Protein hat ein Molekulargewicht von etwa 112 kDa, übereinstimmend mit der UniProt-Annotation, und weist Spektrin-Wiederholungen, eine Coiled-Coil-Domäne und eine Transmembranhelix auf.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Der Antikörper wurde unter Verwendung eines rekombinanten Fusionsproteins entsprechend den Aminosäuren 750–935 von menschlichem Nesprin-3 hergestellt, einer Region innerhalb der Spektrin-Wiederholungsdomäne. Dieses Design kann die Erkennung von volllängen Nesprin-3 und potenziellen Isoformen durch alternatives Spleißen ermöglichen.
• Für den Western Blot (WB) sind Lysate von menschlichen Aortenendothelzellen oder anderen Nesprin-3-exprimierenden Zelllinien geeignete Positivkontrollen. Die erwartete Bandengröße beträgt ~112 kDa. Verwenden Sie geeignete Ladekontrollen und validieren Sie bei Bedarf die Reaktivität in Mausproben.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden. Optimieren Sie Beschichtungs- und Detektionsbedingungen mit gereinigtem rekombinantem Nesprin-3-Protein oder Zellextrakten. Kreuzreaktivität mit anderen KASH-Domänen-Proteinen sollte im experimentellen Kontext evaluiert werden.
• Da der Versand in Eisbeuteln erfolgt, sorgen Sie für eine ordnungsgemäße Lagerung bei Ankunft (z. B. aliquotieren und bei -20°C oder -80°C wie empfohlen lagern), um die Stabilität des Antikörpers zu erhalten.

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