Anti-Nesprin-1-polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA – Q8NF91

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Nesprin 1

• Nesprin-1 (Nuclear envelope spectrin repeat protein 1), kodiert durch das SYNE1-Gen, ist ein modular aufgebautes Protein mit mehreren Isoformen und einem Molekulargewicht von etwa 1011 kDa in voller Länge. Mehrere Spleißvarianten führen zu gewebespezifischen Isoformen, darunter eine kleinere Form mit etwa 112 kDa.
• Als zentrale Komponente des LINC-Komplexes (Linker of Nucleoskeleton and Cytoskeleton) verbindet Nesprin-1 die Kernlamina mit dem Aktin-Zytoskelett, ermöglicht die Übertragung mechanischer Kräfte über die Kernhülle und reguliert die Positionierung und Bewegung des Zellkerns.
• SYNE1 wirkt bei Prozessen wie der Verbindung von Zellkern und Zentrosom sowie der Kernmigration in neuronalen Vorläuferzellen redundant mit seinem Paralog SYNE2, häufig in Verbindung mit SUN-Domänenproteinen und zytoplasmatischen Dynein-Dynactin-Motorkomplexen.
• Auf subzellulärer Ebene lokalisiert Nesprin-1 überwiegend an der äußeren Kernmembran, findet sich jedoch auch an der Kernhülle, am Zytoskelett, an den Sarkomeren und am Golgi-Apparat, was seine vielfältigen Funktionen in der intrazellulären Architektur widerspiegelt.
• Das Protein enthält Spektrin-Wiederholungen und eine C-terminale KASH-Domäne, die es an der Kernhülle verankert. Es unterliegt einer Phosphorylierung und möglicherweise weiteren posttranslationalen Modifikationen, wie durch Proteomikdaten angezeigt wird.
• Nesprin-1 wird weit verbreitet exprimiert, mit den höchsten Konzentrationen in Skelett- und glatter Muskulatur, Herz, Milz und mehreren anderen Geweben. Eine kurze Isoform (GSRP-56) wird überwiegend in Herz- und Skelettmuskel exprimiert.
• Mutationen in SYNE1 stehen mit der Emery-Dreifuss-Muskeldystrophie und anderen Erkrankungen in Zusammenhang, was die kritische Rolle des Proteins für die Muskelfunktion und die Kernmechanik unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 8220–8410 innerhalb der Spektrin-Wiederholungsregion der humanen Nesprin-1-Isoform 2. Diese Sequenz ist in den Orthologen von Maus und Ratte konserviert, was die Kreuzreaktivität unterstützt.
• Bei der Detektion mittels Western Blot ist zu beachten, dass das vollständige Nesprin-1 (~1011 kDa) spezielle Transferprotokolle für Proteine mit hohem Molekulargewicht erfordert. Eine leichter detektierbare Bande bei etwa 112 kDa kann kleinere Isoformen oder Spaltprodukte darstellen.
• Bei Immunfluoreszenzanwendungen zeigt Nesprin-1 typischerweise ein Färbemuster am Kernsaum und filamentöses zytoplasmatisches Färben; eine geeignete Fixierung (z. B. 4% PFA) und Permeabilisierung werden empfohlen.
• Bei der immunhistochemischen Anwendung an Paraffinschnitten kann eine Antigen-Retrieval-Behandlung erforderlich sein; die Spezifität der Färbung sollte mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen validiert werden.

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