Anti-Nephrin Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - O60500

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Nephrin-Funktion und -Lokalisierung

• Nephrin ist ein nierenkörperchenspezifischer Zelladhäsionsrezeptor, der durch das NPHS1-Gen kodiert wird, auch bekannt als NPHN oder CNF. Es ist ein Transmembranprotein mit Immunglobulin-Domänen, Disulfidbindungen und Glykosylierungsstellen (UniProt O60500).
• Es spielt eine kritische Rolle bei der Entwicklung und Funktion der glomerulären Filtrationsbarriere der Niere, reguliert die Gefäßpermeabilität und verankert die Podozyten-Spaltmembran am Aktin-Zytoskelett.
• Nephrin wird spezifisch in Podozyten der Nierenkörperchen exprimiert, was konsistent mit seiner Rolle für die Integrität der Spaltmembran ist.
• Das Protein ist an der Zellmembran lokalisiert und unterliegt einem alternativen Spleißen, wodurch Isoformen mit potenzieller funktioneller Vielfalt entstehen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Glykosylierung, die seine Aktivität und Wechselwirkungen regulieren können.
• Ähnlichkeitshalber wurde Nephrin mit der Bildung der Skelettmuskulatur in Verbindung gebracht, indem es die Fusion von Myoblasten reguliert, was auf Rollen über die Niere hinaus hindeutet.
• Krankheitsassoziierte Varianten von NPHS1 sind mit dem kongenitalen nephrotischen Syndrom verbunden, was seine klinische Bedeutung unterstreicht.
• Schlüsselwörter, die mit Nephrin verbunden sind: Zelladhäsion, Entwicklungsprotein, Krankheitsvariante, Glykoprotein, Membran, Phosphoprotein und Myogenese.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht dem C-terminalen Bereich (Aminosäuren 1019-1241) von menschlichem Nephrin, der intrazellulär ist und möglicherweise weniger glykosyliert ist; dieses Design trägt wahrscheinlich zur Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte bei.
• Für den Western Blot beträgt das erwartete Molekulargewicht ca. 135 kDa; erwägen Sie die Verwendung von reduzierenden Bedingungen, um die reife glykosylierte Form aufzulösen.
• Bei IHC-P wird eine spezifische Färbung in glomerulären Podozyten erwartet; optimieren Sie die Antigen-Retrieval- und Detektionsmethoden für formalinfixierte, in Paraffin eingebettete Nierenschnitte.
• Für ELISA wird die Kombination mit einem Detektionsantikörper, der ein anderes Epitop anzielt, empfohlen; dieser monoklonale Antikörper kann als Capture- oder Detektionsantikörper verwendet werden.
• Validieren Sie die Kreuzreaktivität in Nierenproben von Maus und Ratte, da die Sequenzhomologie im Immunogenbereich die Reaktivität beeinflussen kann.

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