Anti-NEK7 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q8TDX7

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von NEK7

• NEK7 (NIMA-verwandte Kinase 7) ist eine Serin/Threonin-Protein-Kinase, die eine wesentliche Rolle bei der Mitose des Zellzyklus spielt, einschließlich der Zentrosomen-Mikrotubuli-Nukleation, der Bildung der mitotischen Spindel und der Zytokinese.

Verwandte Referenzen: PMID:17101132 PMID:19941817 PMID:17586473 PMID:19414596

• Es phosphoryliert nachgeschaltete Ziele wie EML4 an Ser-146, fördert dessen Dissoziation von Mikrotubuli für eine effiziente Chromosomenkongression und wirkt auf RPS6KB1.

Verwandte Referenzen: PMID:31409757

• Über die Mitose hinaus dient NEK7 als kritischer Aktivator des NLRP3-Inflammasoms, das NLRP3 am Mikrotubulus-Organisationszentrum (MTOC) aktiviert und die CASP1-Aktivierung unabhängig von seiner Kinaseaktivität ermöglicht.

Verwandte Referenzen: PMID:26642356 PMID:31189953 PMID:36442502 PMID:39173637

• Die Interaktion von NEK7 mit NEK9 erzwingt eine gegenseitige Ausschließlichkeit zwischen Inflammasomaktivierung und Zellteilung und wirkt als zellulärer Schalter.

Verwandte Referenzen: PMID:26642356 PMID:31189953

• Subzellulär lokalisiert NEK7 im Kern, Zytoplasma, an den Spindelpolen, Zentrosomen und dem MTOC.

• Es ist hoch exprimiert in Lunge, Muskel, Hoden, Gehirn, Herz, Leber, Leukozyten und Milz, mit geringerer Expression in Ovar, Prostata und Niere; fehlt im Dünndarm.

• Wichtige strukturelle und regulatorische Merkmale umfassen eine ATP-bindende Kinasedomäne, metallbindende Stellen und posttranslationale Modifikationen wie Acetylierung und Phosphorylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt eine konservierte Region (AA 203-302) von menschlichem NEK7 ab; wird aufgrund der hohen Sequenzhomologie zum Nachweis von endogenem Protein ~35 kDa im WB mit Proben von Menschen, Mäusen und Ratten erwartet.
• Für WB empfehlen sich Gesamtzelllysate aus gängigen Zelllinien (z. B. HeLa, HEK293T, Jurkat) als Positivkontrollen; die Validierung mit spezifischen Knockdown- oder Knockout-Proben bestätigt die Bandenidentität.
• Für ELISA kann rekombinantes NEK7-Protein oder Peptid als Beschichtungsantigen verwendet werden; titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Arbeitskonzentration in Ihrem Assaysystem zu bestimmen.
• Bei der Untersuchung von inflammasomassoziierten Signalwegen sollten geeignete Aktivierungsbehandlungen (z. B. LPS-Priming + Nigericin) zur Untersuchung der Rolle von NEK7 eingeschlossen werden; beachten Sie, dass seine Funktion bei der NLRP3-Aktivierung kinaseunabhängig ist.
• Aufgrund der nuklearen und zytoplasmatischen Lokalisation kann eine subzelluläre Fraktionierung eingesetzt werden, um spezifische Kompartimente vor der Detektion anzureichern.

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