Anti-NEK2 monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P51955

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von NEK2

• NEK2 ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, auch bekannt als HSPK 21, NimA-verwandte Proteinkinase 2 (NimA-related protein kinase 2) und NimA-ähnliche Proteinkinase 1.
• Es spielt eine entscheidende Rolle bei der Zentrosomentrennung und der Bildung bipolärer Spindeln während der Mitose und gewährleistet eine hochgenaue Chromosomensegregation.
• NEK2 reguliert die Stabilität der Kinetochor-Mikrotubulus-Bindung durch Phosphorylierung von NDC80 und steuert den mitotischen Kontrollpunkt durch Phosphorylierung von CDC20 und MAD2L1.
• Es phosphoryliert zentrosomale Proteine wie CROCC, CEP250, NINL, CEP68 und CNTLN, um deren Verdrängung von den Zentrosomen zu fördern – ein Prozess, der für die Trennung der Zentrosomen essenziell ist. Zugehörige Referenzen: PMID:24554434, PMID:25704143, PMID:26220856
• NEK2 phosphoryliert außerdem CCDC102B, was dessen Dissoziation vom Zentrosom bewirkt und die Trennung erleichtert. Zugehörige Referenzen: PMID:30404835
• Das Protein ist im Zentrosom, an den Spindelpolen, Kinetochoren und im Zellkern/Nukleolus lokalisiert, was seine dynamische Rolle während des gesamten Zellzyklus widerspiegelt.
• Es gibt zwei Hauptisoformen: Isoform 1 und 2 sind weit verbreitet exprimiert, Isoform 4 kommt im Hoden vor; NEK2 ist in verschiedenen Krebserkrankungen hochreguliert.
• Posttranslationelle Modifikationen umfassen Phosphorylierung, und das Protein enthält eine ATP-bindende Domäne und eine Coiled-Coil-Region.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 1-100), sodass bei Konservierung der Sequenz mehrere Isoformen nachgewiesen werden können.
• Für Western Blot ist eine Bande bei etwa 52 kDa zu erwarten; die optimale Antikörperverdünnung muss empirisch bestimmt werden.
• Bei der Verwendung dieses Antikörpers für ELISA erwägen Sie die Paarung mit einem passenden Detektionsantikörper für Sandwich-Assays; validieren Sie die Leistung im entsprechenden Probensystem.
• Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-NEK2 wurde nachgewiesen; überprüfen Sie die Sequenzhomologie zwischen den Arten, um Ihre Versuchsplanung zu fundieren.

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