Anti-NEDD8-Kaninchen-Polyklonalantikörper für WB und ELISA – Q15843

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von NEDD8

• NEDD8 ist ein ubiquitinähnliches Protein (auch als Neddylin bezeichnet), das strukturelle Ähnlichkeit mit Ubiquitin aufweist und eine Schlüsselkomponente des Neddylierungswegs darstellt. Beim Menschen wird es durch das NEDD8-Gen (GeneID: 4738) kodiert.
• NEDD8 spielt eine wichtige Rolle bei der Kontrolle des Zellzyklus und der Embryogenese. Die Konjugation von NEDD8 an Culline (Neddylierung) ist für die Rekrutierung des E2-Enzyms zum Cullin-RING-E3-Ubiquitin-Ligasekomplex erforderlich und erleichtert die Polyubiquitinierung sowie den anschließenden proteasomalen Abbau von Cyclinen und anderen regulatorischen Proteinen.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:10318914, PMID:10597293, PMID:11953428
• Die Neddylierung des Tumorsuppressors p53/TP53 hemmt dessen Transkriptionsaktivität und stellt eine Verbindung zwischen NEDD8 und der p53-Regulation her.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:15242646
• NEDD8 neddyliert außerdem den epidermalen Wachstumsfaktorrezeptor (EGFR), was zu einer Stabilisierung des Proteins und dessen Translokation zur Zellmembran führt.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:28891468
• Die kovalente Anheftung von NEDD8 an seine Substrate erfordert zunächst die Aktivierung durch den E1-Komplex UBE1C-APPBP1 und die Verbindung mit dem E2-Enzym UBE2M.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:14690597
• NEDD8 ist hauptsächlich im Zellkern lokalisiert, was mit seiner Rolle bei der Regulation des Zellzyklus und der Transkription übereinstimmt.
• Es wird stark im Herzen, in der Skelettmuskulatur, Milz, Thymus, Prostata, im Hoden, Eierstock, Kolon und in peripheren Blutleukozyten exprimiert.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen von NEDD8 gehören die Acetylierung und die Bildung von Isopeptidbindungen während der Neddylierung. Das reife Protein hat ein Molekulargewicht von etwa 9 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst das vollständige NEDD8-Protein (Aminosäuren 1–81), daher erkennt der Antikörper wahrscheinlich die reife Form mit 9 kDa. Für den Western Blot sollten Gele mit hohem Polyacrylamidanteil (z. B. 15 % SDS-PAGE) und geeignete Marker für niedrige Molekulargewichte verwendet werden.
• Der Antikörper ist für WB- und ELISA-Anwendungen angegeben; seine Eignung für andere Techniken wie IHC oder IF muss möglicherweise experimentell validiert werden.
• Eine Kreuzreaktivität mit NEDD8 aus Maus und Ratte ist angegeben. Es wird jedoch empfohlen, die Reaktivität im jeweiligen experimentellen System zu überprüfen.
• Für ELISA kann der Antikörper sowohl als Fang- als auch als Detektionsantikörper in einem Sandwich-Format verwendet werden. Eine Optimierung der Beschichtungs- und Detektionsbedingungen wird jedoch empfohlen.
• Den Antikörper gemäß den Empfehlungen lagern (Versand auf Kühlakkus) und wiederholte Einfrier-Auftau-Zyklen vermeiden, um die Stabilität zu erhalten.

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