Anti-NEDD8 Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB, ELISA - Q15843

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: NEDD8-Funktion und -Lokalisierung

• NEDD8 ist ein Ubiquitin-ähnliches Protein, das an Cullins und p53/TP53 konjugiert und für die Kontrolle des Zellzyklus und die Embryonalentwicklung essentiell ist. Seine Bindung an Cullins ermöglicht die Rekrutierung von E2 an den Cullin-RING-E3-Ligase-Komplex, was die Polyubiquitinierung und den proteasomalen Abbau von Zyclinen und Regulationsproteinen erleichtert. Verwandte Referenzen: PMID:10318914 PMID:10597293 PMID:11953428
• Die Konjugation von NEDD8 an p53/TP53 hemmt dessen transkriptionelle Aktivität. Verwandte Referenzen: PMID:15242646
• Die Aktivierung von NEDD8 erfordert den E1-Komplex UBE1C-APPBP1 und das E2-Enzym UBE2M. Verwandte Referenzen: PMID:14690597
• NEDD8 neddyliert auch EGFR, stabilisiert das Protein und fördert dessen Translokation zur Zellmembran. Verwandte Referenzen: PMID:28891468
• Die subzelluläre Lokalisierung ist vorwiegend nukleär.
• Hohe Expression in Herz, Skelettmuskel, Milz, Thymus, Prostata, Hoden, Eierstock, Dickdarm und peripheren Blutzellen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und die Bildung von Isopeptidbindungen, mit einem Molekulargewicht von ca. 9 kDa (UniProt: 9072 Da).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die N-terminalen 81 Aminosäuren des menschlichen NEDD8 (NP_006147.1) abdeckt, eine Sequenz, die zwischen Mensch, Maus und Ratte hochkonserviert ist, was eine breite Kreuzreaktivität gewährleistet.
• Für die Western-Blot-Analyse beachten Sie die Masse von ~9 kDa; verwenden Sie ein Gel mit hohem Prozentsatz (15 %) und optimieren Sie die Proteintransferbedingungen, um ein Überlaufen zu verhindern, und validieren Sie die Leistung in relevanten Zell- oder Gewebelysaten.
• Für ELISA: Kombinieren Sie mit einem passenden Detektionsantikörper oder verwenden Sie es als Detektionsreagenz; eine empirische Optimierung der Beschichtungs- und Detektionsbedingungen wird empfohlen.
• Obwohl für Mensch, Maus und Ratte validiert, sollte die Kreuzreaktivität mit anderen Spezies durch einen Sequenzabgleich der Immunogenregion überprüft werden.

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