Anti-NEDD4 polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P46934

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NEDD4-Funktion und Lokalisierung

• NEDD4 (neural precursor cell expressed developmentally down-regulated protein 4) ist auch bekannt als RPF1, NEDD4-1 und Zellproliferations-induzierendes Gen-53-Protein. Es handelt sich um eine HECT-Typ-E3-Ubiquitin-Ligase, die eine entscheidende Rolle beim Proteinabbau, der Rezeptorsignalgebung und der Autophagie spielt.
• Als E3-Ubiquitin-Ligase akzeptiert NEDD4 Ubiquitin von E2-Enzymen und überträgt Ubiquitin spezifisch auf Lysin-63 von Zielsubstraten, wodurch Polyubiquitinketten gebildet werden. Verwandte Referenzen: PMID:19920177, PMID:21399620, PMID:23644597
• NEDD4 ubiquitiniert eine Vielzahl von Substraten, darunter Wachstumsfaktorrezeptoren (IGF1R, FGFR1, EGFR), Signalproteine (RAPGEF2, TNK2, BRAT1, DAZAP2) und Transkriptionsmaschinerie (POLR2A), und zielt dabei viele auf Internalisierung und lysosomalen oder proteasomalen Abbau ab. Verwandte Referenzen: PMID:21765395, PMID:11598133, PMID:20086093, PMID:25631046, PMID:11342538, PMID:19920177
• Die Rolle von NEDD4 bei der Regulierung der PTEN-Stabilität durch Polyubiquitinierung wird diskutiert; einige Studien deuten auf einen direkten Zusammenhang hin, während andere ihn in Frage stellen. Verwandte Referenzen: PMID:18562292, PMID:17218260
• NEDD4 fungiert als Plattform zur Rekrutierung von USP13 und bildet einen Deubiquitinierungskomplex, der Lys-48-verknüpfte Ubiquitinketten von VPS34 spaltet, VPS34 stabilisiert und die Autophagosomenbildung fördert. Verwandte Referenzen: PMID:32101753
• Während einer Virusinfektion ubiquitiniert NEDD4 das Ebola-Virus-Protein VP40 und trägt so zum viralen Knospen bei.
• NEDD4 lokalisiert im Zytoplasma, im Zellkern und an der Zellmembran und unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Acetylierung und Phosphorylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 160-460, eine zentrale Region von humanem NEDD4, was darauf hindeutet, dass der Antikörper mehrere Isoformen oder funktionelle Domänen erkennen könnte; eine Validierung im beabsichtigten Probensystem wird empfohlen.
• Für Western Blotting beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 149 kDa; erwägen Sie die Verwendung eines Gels mit niedrigerem Prozentsatz (z.B. 6-8%) und längeren Transferzeiten, um einen effizienten Transfer hochmolekularer Proteine sicherzustellen.
• Bei der Immunhistochemie (Paraffin-eingebettete Gewebe) müssen die Antigen-Retrieval-Bedingungen möglicherweise optimiert werden; schließen Sie geeignete positive und negative Kontrollen ein, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für ELISA kann die polyklonale Natur eine hohe Avidität bieten; bewerten Sie die Leistung sowohl als Capture- als auch als Detektionsantikörper und validieren Sie gegen relevante rekombinante Standards.

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