Anti-NEDD4 monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P46934

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NEDD4-Funktion und Lokalisierung

• NEDD4 (Neural precursor cell expressed developmentally down-regulated protein 4) ist eine HECT-Typ E3-Ubiquitin-Protein-Ligase, die Ubiquitin auf Zielproteine überträgt und hauptsächlich Lys-63-verknüpfte Polyubiquitinierung katalysiert. Verwandte Referenzen: PMID:19920177 PMID:21399620 PMID:23644597
• Es reguliert Rezeptor-Tyrosinkinasen durch Monoubiquitinierung von IGF1R und FGFR1, was zu deren Internalisierung und lysosomalem Abbau führt. Verwandte Referenzen: PMID:21765395
• NEDD4 ubiquitiniert wichtige Signalmoleküle, einschließlich VEGFR-2/KDFR, RAPGEF2, ERBB4 intrazelluläre Domäne, TNK2 und POLR2A, und beeinflusst Prozesse wie neuronale Dendritenentwicklung, EGFR-Signalgebung und Transkriptionsregulation. Verwandte Referenzen: PMID:11598133 PMID:20086093 PMID:19920177
• Es bildet mit USP13 einen Deubiquitinierungskomplex, um Lys-48-verknüpfte Ubiquitinketten von VPS34 abzuspalten, stabilisiert VPS34 und fördert die Autophagosomenbildung. Verwandte Referenzen: PMID:32101753
• Subzellulär lokalisiert NEDD4 im Zytoplasma, Zellkern und an der Zellmembran, was mit seinen Rollen bei der Endozytose, nukleären Signalgebung und dem Membran-assoziierten Proteinumsatz übereinstimmt.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, und posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität und Interaktionen regulieren können.
• Während einer Virusinfektion ubiquitiniert NEDD4 das Ebola-Virus-VP40-Protein und erleichtert so das Knospen des Virus.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 1200–1300 innerhalb der C-terminalen Region von humanem NEDD4. Bestätigen Sie die Reaktivität des Antikörpers mit spezifischen Isoformen, wenn mehrere Varianten in der Zielprobe vorhanden sind.
• Für Western Blotting hat NEDD4 ein vorhergesagtes Molekulargewicht von ~149 kDa. Verwenden Sie einen geeigneten Gelprozentsatz (z.B. 6–8% SDS-PAGE) und verlängerte Transferzeiten, um ein effizientes Blotten von Hochmolekulargewichtsproteinen sicherzustellen.
• Validieren Sie den Antikörper in Ihrem Proben-System unter Verwendung positiver Kontrollen (z.B. HEK293- oder HeLa-Lysate), um Spezifität und Empfindlichkeit für die beabsichtigte Anwendung sicherzustellen.
• Für ELISA sollten Sie die Beschichtungs- und Detektionsbedingungen optimieren, um ein maximales Signal-Rausch-Verhältnis zu erreichen.

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